植物基因功能分析高通量双元载体-生物化学和分子生物学专业论文.docx

优秀毕业论文 精品参考文献资料 植 物 基 因 功 能 分 析 高通 量 双 元 载 体 摘要 工 公 司 利 用 人 噬 菌 体 点 特 性 重 组 系 统 建 立 的 重 组 克 隆 技 术 极 大 的方 便 了 目的 基 因 的 高通 量 的 克 隆 目 的 基 因 首 先 穿梭 到 入 门载 体 中 然 后 根 据 各 种 模 式 生 物 研 究 的 需 要 重 组 到 的 各 种 目的 载 体 中去 由 于 其 高通 量 的 高 效 克 隆 的特 点 许 多 实 验 室 构 建 了 很 多 可 以用 来研 究 启 动 子 分 析 蛋 白质 定 位 蛋 白与 蛋 白相 互 作 用 组 成 型 以及 可 诱 导 性 表 达 为 了 满足 高等 植 物 功 能 基 因 研 究 的 需 要 我 们 构 建 了 一 系列 高 通 量 的 可 以用 来 进 行 农 杆 菌 介 导 植 物 转 化 的 双 元 载 体 这 些 载 体 不 仅 具 有 高通 量 的特 点 同 时 通 过 引 入 特 异 的 多 克 隆 位 点 可 以非 常 方 便 的 进 行 启 动 子 的 替换 因 此 这 系 列 载 体 能够 根 据 研 究 的 需要 实现 目的基 因 的组 成 型 组 织 特 异 性 及 诱 导 性 等 可 调 控 化 表 达 启 动 子 的 分 析 也 可 以通 过 融 合 实 现 对 蛋 白质 亚 细胞 定 位 的研 究 以 及 实现 目的基 因 的组 成 型 组 织 特 异 性及 诱 导 性 敲 除 本 文 首 先 介 绍 了 植 物 转 基 因 所 使 用 的 双 元 载 体 相 关 内 容 同 时 介 绍 了 目前 所 发 展 的 采 用 尹 重 组 克 隆 技术 建 立 起 来 的 植 物双 元 载 体 功 能 以及 相 关 的参 考 文 献 并详细 介 绍 我 们 构建 的 双 元 载 体 的使 用 情 况 包 括 功 能 使 用 方 法 和 使 用 注 意 事 项 关键 词 双 元 载体 高通 量 重 组 克 隆 启 动 子 分 析 融 合 基 因 沉 默 植 物 基 因 功 能分析 高通 量 双 元 载 体 第 一 章 背景 综述 一 农 杆 菌 介 导 的 植 物 转 基 因 载 体 农 杆 菌 是 一 种 土 壤 杆 菌 使 一 些 双 子 叶 植 物 发 病 通 过 伤 口 感 染 植 物 并 在 伤 口 处 诱发 形 成 冠 瘦 病 或 者 冠 瘦 瘤 在 感 染 过 程 中 农 杆 菌 将 质 粒 中 的 一 部 分 转 移 到 植 物 细 胞 中并整 合 到 植物 的 基 因 组 质 粒包 括 和 个 与 转移 相 关 的 基 因 这 些 基 因 聚 集 在 一 起 通 过 反 式 作 用 使 转 移 到 植 物 细 胞 中 上 含 有诱 导瘤 形 成 基 因 冠 瘦碱 合 成 基 因 和 其 他 的 一 些 起 源 于 细 菌但 是 在 植物 细 胞 中发 挥 功 能 的基 因 整 合 到 植物 基 因 组 之 后 诱 导 植 物 在 感 染 部 位 形 成 瘤 冠 瘦 组 织 合 成 的 一 些 稀 有 氨 基 酸 和 冠 瘦 碱 为 农 杆 菌 的 生 长 提 供 重 要 的碳 源 和 氮 源 农 杆 菌 介 导 的植 物 转化 系 统 利 用 了这 个 天 然 的转化 机 制 并 且 对 其 致 瘤 性 进 行 改造 通 过 将 上 所 有 的 基 因 去 除 使 其 仅 保 留 转移 的功 能而 不 再 具 有 致瘤 性 即 去 甲 农 杆 菌 介 导 的质 粒 载 体 系 统 正 是 利用 了 这 种天 然 的转 化 机 制 将 外 源 的 转 入 植物 基 因 组 中 农 杆 菌 介 导 的基 因 转移 是 在 和 基 因簇 两 者 共 同 的作用 下 完 成 的 这 两 部分 可 以在 不 同 的质 粒 上 一 种质 粒 携 带有转 化 所 需 妥 的 基 因 另 一 个 质 粒 携 带 有 两 个 的 边 界 重 复 序 列 待 转 移 的 外 源 基 因 被 克隆 在 两 个 边 界 重 复序 列 之 间 两 者 共 同构 成 通 常 所 指 的 双 元 载 体 基 因 的 功 能 由寄生 在 农 杆 菌 中 的 去 甲 质 粒 所 提 供 人 们 通 过 对 这 些 质 粒 进 行 改 造 形 成 了 不 同 的农 杆 菌 菌 株 双 元 载 体 的发 展 和 不 同 的农 杆 菌 菌 株 的 建立 使农 杆 菌介 导 的 植 物 转 化 系统