实验六土壤中微生物的分离纯化及观察.ppt

实验六 土壤中微生物的分离纯化及观察 基本原理 器材 分离源：自采集土壤样品 培养基 牛肉膏蛋白胨琼脂培养基，酵母膏蛋白胨培养基 溶液或试剂 盛4.5ml无菌水的试管，盛90ml无菌水并带有玻璃珠的三角烧瓶。 仪器或其他用具 振荡器，无菌吸管，接种环，电炉，培养箱，吸耳球等。 1.制备土壤稀释液 2.倒平板 3.混菌平板冷却至45 ℃时，加入0.2ml稀释后的菌液，混均。4.培养 将酵母膏蛋白胨琼脂培养基平板倒置于28 ℃ 培养2～3d，牛肉膏蛋白胨平板倒置于37 ℃ 培养培养1～2d 。5.挑菌落 将培养出的单菌落进行斜面接种，并分别置37℃和28℃温室中培养，此后镜检是否为单一微生物。若有杂菌，继续分离纯化。 （二）平板划线分离法 1.倒平板 2.划线 3.挑菌 挑取单个菌落接种到斜面上培养，此后镜检是否为单一微生物。若有杂菌，继续分离纯化。 实验结果(P74 五.1) 你所做的稀释混匀法和划线法是否较好地得到了单菌落？如果不是，请分析其原因。 在不同的平板上你分离得到了哪些类群的微生物？简述它们的菌落特征。 思考题 如何确定平板上某个单菌落是否为纯培养？请写出实验的主要步骤。(P74 五.2.(1)) 如果一项科学研究内容需从自然界中筛选到能产高温蛋白酶的菌株，你将如何完成？请写出简明的实验方案。(P74 五.2.(4)) 目的要求 1.掌握倒平板的方法和几种常用的分离纯化微生物的基本操作技术。 2.观察并识别微生物的菌落特征（群体形态）。 从混杂的微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为微生物的分离与纯化。 1.简易单细胞挑取法 （简易单孢子分离法） 2.平板分离法 选择适宜的培养基，微生物在固体培养基上生长形成的单个菌落可以是由一个细胞繁殖而成的集合体。 挑取单菌落可获得一种纯培养。 方法：稀释混菌法、平板划线法 本次实验最高稀释到10－6 （一）稀释混菌法 分区划线（适用于浓度较大的样品） 连续划线（适用于浓度较小的样品）