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RBC红细胞 Hb血红蛋白HCT红细胞压积检测 * * 一、血红蛋白测定 血红蛋白(hemoglobin,Hb或HGB) (一)血红蛋白分子结构及成分 蛋白:珠蛋白 α类多肽链:αζθ 血红蛋白 非α类多肽链:βεδγ 辅基:亚铁血红素(血红素) (二)血红蛋白的合成 受激素调节 红细胞生成素:促进ALA的生成和铁的利用,从而促进血红素和Hb的合成 雄激素:促进ALA合成酶的生成,促进EPO的生成 人体发育期血红蛋白的组成 ζ2ε2 α2ε2 ζ2γ2 Hb Gower I Hb Gower II Hb Portland 胚胎期 α2γ2 α2β2 HbF HbA 胎儿期 α2β2 α2δ2 HbA HbA2 成人期 分子组成 Hb种类 发育阶段 血液中血红蛋白以各种形式存在: 氧合血红蛋白(oxyhemoglobin) 碳氧血红蛋白 (carboxyhemogloin) 高铁血红蛋白 (hemiglobin,Hi) (三)血红蛋白的代谢 1. 珠蛋白 酶 氨基酸组分(内源性氨基酸) 血红蛋白分子 降解 氨基酸代谢 2. 血红素 Fe2+由单核巨噬细胞系统 加工 循环血液 与运铁蛋白结合 进入铁代谢库 血红蛋白检测: Hb测定方法大致分为四大类 根据Hb分子组成测定总Hb(全血铁法); 根据血液物理特性测定Hb(比重法、折射仪法); 根据Hb与O2可逆结合的特性测Hb(血气分析法); 根据Hb衍生物光谱特点定量测定Hb; 国际血液学标准化委员会推荐氰化高铁血红蛋白测定法为Hb测定的标准参考方法 氰化高铁血红蛋白测定法(hemiglobincyanide, HiCN) 血红蛋白 高铁氰化钾氧化 高铁血红蛋白 CN- 氰化高铁血红蛋白(棕红色)540nm测定吸光度 2. 其它测定法: 叠氮高铁血红蛋白法 碱羟血红蛋白法 沙利酸化血红蛋白法 方法学评价: 氰化高铁血红蛋白法(HiCN) 优点: 操作简单 显色快,结果稳定可靠 可检测除硫化血红蛋白外的各种血红蛋白 缺点: 氰化钾有剧毒,使用时应注意 高白细胞和高球蛋白血症可使试剂混浊, HbCO转化较慢 氰化高铁血红蛋白法(HiCN) 注意事项: 应注意仪器、比色杯、试剂及操作的标准化; 仪器的校准是关键 常用HiCN参考液,绘制标准曲线,求出K值来校正结果(K=∑Hb/∑A) Hb = A × K A Hb 其它方法: 1. 十二烷基硫酸钠(SDS)血红蛋白测定法 优点: 操作简单,显色稳定,准确性和精确性符合要求,且无公害 全国临床检验方法学学术会议上,被推荐为次选方法 缺点: SDS本身质量差异较大,且破坏白细胞,不适于同时用于有白细胞计数和Hb测定的血细胞分析仪。 2. 叠氮高铁血红蛋白(HiN3)测定法 优点: 同HiCN 缺点: 虽然毒性小于HiCN,但仍有公害问题 3. 碱羟血红蛋白(AHD575)测定法 优点: 试剂简单,不含有毒剂,显色稳定,可用氯化血红素作标准品。 缺点: 测定波长为575nm, 与仪器常用的540nm滤光板不匹配。 4.沙利法 优点: 操作简单 缺点: 误差较大,建议淘汰。 5、仪器法 优点: 操作简单,快速,可同时获得多项红细胞参数 注意: 不同仪器使用的溶血剂不同,形成Hb的衍生物不同,应严格控制溶血剂加入量及溶血时间。 质量控制 标本:异常血浆蛋白、高脂血症、白细胞数大于30 × 109/L等可产生浊度,干扰Hb测定。 方法:HiCN是首选方法,仪器法优于手工法。 器材:应使用高精度的微量吸管、比色杯,并对仪器定期校准。 采血部位:静脉血比毛细血管血结果低10~15%。 结果分析: 参考值: 1.成年: 男性:120~160g/L; 女性:110~150g/L 2.新生儿:170~200g/L 3.老年(70岁以上): 男性:94~12
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