淋巴细胞表面标志和功能检测.pptVIP

淋巴细胞表面标志的检测及亚群分类 彭晓东 主要内容 淋巴细胞的表面标志 淋巴细胞表面标志的检测 淋巴细胞功能的检测 参与免疫应答的细胞分为三类： 淋巴细胞 主要有T、B、NK、K细胞等， 在免疫应答中起核心作用。 单核-巨噬细胞 包括单核细胞和巨噬细胞， 在免疫应答中起辅佐作用。 其他免疫细胞 包括中性粒细胞、嗜酸性 粒细胞、肥大细胞、血小板等， 参与免疫效应。 淋巴细胞lymphocyte 构成机体免疫器官的基本单位，是体内极为复杂的不均一细胞群体，包括许多形态上相似而功能和表面标志各不相同的亚群，具有明显的异质性。 T、B细胞是其中最主要的两大群体。 表面标志（epitope）： 淋巴细胞表面可供鉴别的特殊结构 在淋巴细胞分化的不同阶段，其各种表面标志的表达各不相同。 淋巴细胞与其它细胞、分子之间的相互作用以及淋巴细胞发挥生物学作用（识别抗原、活化、辅助、抑制、杀伤等）均与其表面标志有关。 淋巴细胞表面标志可用于： 1. 淋巴细胞及其亚群的鉴别 2. 研究淋巴细胞分化过程和功能 3. 临床上研究某些疾病的发病机 制和诊断方法。 T 淋巴细胞表面标志 1. 簇分化抗原(cluster of differentiation, CD) 糖蛋白，有核细胞在发育的不同阶段及不同的细胞亚群均可表达不同的分化抗原，是区分T淋巴细胞的重要标志。 目前已鉴定的CD分子达100多种，已弄清50%以上CD分子编码基因的核苷酸序列及其染色体定位。大多数CD分子分布于各种类型的白细胞表面，但近年发现还广泛分布在造血和非造血细胞上。 常用单克隆抗体来鉴定和检测计数T细胞及亚群的表面标志（CD） 表13-1 Ｔ细胞表面主要CD抗原及其分布 CD抗原 分 布 CD2（ER） 全部Ｔ细胞和NK细胞 CD3 成熟Ｔ细胞 CD4 （HIVR） TH/Td细胞、Mφ CD8 Tc/Ts细胞、部分NK细胞 CD25（IL-2R） 活化Ｔ细胞 CD28 活化Ｔ细胞 CTLA-4 活化Ｔ细胞 CD40L 活化Ｔ细胞 T细胞主要的CD抗原 （1）CD2： 表达于全部T细胞和NK细胞表面；由3种抗原性不同的分子组成（CD2-1，2，3），CD2-1，2表达于静止细胞表面，CD2-3表达于活化的T细胞表面。 它是粘附分子之一，在抗原提呈过程中起辅助作用。 CD2可与绵羊红细胞（SRBC）结合，故又称绵羊红细胞受体（E受体），是人类T细胞的重要表面标志。用于检测外周血T细胞总数，称为E花环试验。(K：注意与EAC区别) E受体具有重要的生物学意义，CD2与其配体（如抗T11McAb）结合有类似丝裂原的作用，使T细胞活化、增殖、表达IL-2受体（T细胞激活的旁路途径） 。 （2）CD3： 6肽复合分子，表达于全部T细胞表面，是T细胞共有的表面标志。 CD3 与TCR非共价结合形成完整的TCR-CD3复合体， CD3可将TCR与抗原结合所产生的活化信号传递入T细胞内，使之活化、增殖。 （3）CD4/CD8： T细胞亚群的表面标志。 CD4+T细胞 辅助性T细胞（T helper ，TH ），主要识别MHCⅡ类分子结合的外源性多肽抗原，具有辅佐或诱导免疫应答的功能，部分细胞也有杀伤和抑制功能； CD8+T细胞 细胞毒性T细胞