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细菌性传染病的检测 鼠疫杆菌的检验 霍乱的检测 流脑的检测 鼠疫（Plague） 由鼠疫杆菌引起的最严重的烈性传染病之一，传染性强，病死率高。 通过跳蚤等媒介传播，在特定的环境中流行于啮齿动物之间的自然疫源性疾病。 鼠疫杆菌病原学 分类 菌体形态 培养特性 生化特性 抵抗力 毒力因子 1970年国际生物命名委员会的小组委员会决定： 鼠疫菌在分类学上属 真菌目 Ordey Eubacteriales 肠杆菌科 Family Enterobacteriaceae 耶尔森氏菌属 Genus Yersinia 鼠疫杆菌 Yersinia Pestis 假结核杆菌Yersinia Pseudotuberculosis 小肠结肠炎杆菌Yersinia Enterocolitica 菌体形态 G-R，两极浓染，两端钝圆的短小杆菌，有荚膜、无鞭毛，不产生芽胞。菌体长约1.0～2.0μm，宽0.3～0.7μm。 脏器压片 固体培基上鼠疫菌落涂片：呈典型形态， 两极浓染有时不明显，菌体散在或呈小堆状分布。 肉汤物涂片：两极浓染明显，常呈链状。 陈旧培养物涂片： 退化型或衰残型，呈多形态（球形、杆状等），这些细胞在适宜的新培基上传代或通过易感动物，有些菌细胞又能恢复到正常细胞形态。 培养特性 兼性厌氧菌。 生长温度范围-2~45℃，最适温度 28℃~30℃。 培养物保存于4~5℃，该温度下鼠疫菌能繁殖，常 用于污染材料的增菌分离培养。 在固体培基上28℃培养，菌落（菌苔）较干，易取下；37 ℃培养，产生丰富F1抗原，菌落（菌苔）湿润、粘稠，不易刮取。 pH 5.8~8.0均可发育，最适pH 6.9~7.1。 培养特征 在普通培养基上：10几个小时呈碎玻璃状微小菌落；24或48小时以后呈成熟菌落：在透射光下呈灰白色；反射光下菌落隆起呈淡灰白色；光学显微镜下菌落中央暗，有黄褐色粗糙颗粒，周边围绕边缘不整呈锯齿状、薄而透明的花边，具有重要诊断意义。 肉汤或消化汤培养：特征性发育，钟乳石状下垂，液面有薄膜或与管壁呈白色环状，培养液透明，有诊断意义。 生化特性 葡：葡萄糖 ， 甲：甲基红 ， 尿：尿素 ，明：明胶 ，阿：阿拉伯糖 木：木糖， 甘：甘露醇， 麦：麦芽糖 致病性 F1抗原 V和W抗原 鼠疫杆菌素（PstⅠ） 色素沉着因子（Pgm） 鼠疫杆菌的检验 样品采集 疑似腺鼠疫：应选取肿大的淋巴结抽取组织液，保存于灭菌试管内或直接接种于血琼脂平板，淋巴结肿大不明显者，可先向淋巴结内注射0.3～0.5ml灭菌生理盐水，稍停后再行抽取，感染后期可在肿大的淋巴结周围穿刺抽取组织液。 疑似肺鼠疫病人：可令病人对血琼脂平板咳嗽，或将带血痰液标本收集于灭菌平皿或广口瓶内备检，用灭菌棉拭子涂擦咽部分泌物，将拭子保存于灭菌试管或灭菌生理盐水管内备检。 疑似败血症：应采取静脉血液1ml以上； 疑似眼鼠疫：采集眼的分泌物； 疑似肠鼠疫：粪便 疑似皮肤型鼠疫：处于水疱、脓泡期时，可抽取脓泡内容物备检，处于溃疡、结痂期时，应以灭菌镊子持灭菌棉球涂擦溃疡面和痂皮下的创面，将棉球保存于灭菌试管或灭菌盐水内备检； 疑似脑膜炎型鼠疫：用腰椎穿刺法抽取脑脊液 样品送检 所取材料均应保存于灭菌器皿内；组织块可保存于灭菌生理盐水中，或用5～10ml Broke 氏液保存，亦可应用Cary Bleir培养基保存运送材料。容器用石蜡密封。 所有检材应包装严密，在2～8℃保存条件下由专人（至少2人）专车直接送检。送样时应准确填写送检单，交接样品时首先检查包装，绝对不能有破损、污染，如有破损应立即消毒并报告卫生行政部门。材料交接时按清单点清种类、数量，并准确记录签字。 镜检 各种脏器组织直接压印，血液及其他液体材料固定、涂片、染色、观察菌体形态。 分离培养 新鲜材料：溶血赫氏琼脂培养基。 腐败材料：龙胆紫赫氏琼脂培养基。 动物标本：按正常解剖顺序、无菌操作分别取被检动物的腺、肝、脾、肺、心、骨髓6部位标本直接压印培养，接种环划线，各区之间不能交叉。每份标本划2个平皿 。 注：自死动物和病态食肉动物的检菌培养。 蚤类培养：病死鼠的体蚤均需单匹培养，用生理盐水冲洗3次，1/10万的龙胆紫灭菌盐水冲洗3次，研磨接种于龙胆紫培养基上。 鼠疫患者及尸体标本：患者淋巴结穿刺液、痰液、脓液、血液等液体标本直接接种于培养基上，点状或划线培养，固体标本同前。 鼠疫噬菌体裂解试验 鼠疫噬菌体是具有严格寄生性的细菌病毒，能在宿主细胞内繁殖，并将其裂解。鼠疫噬