三研-2010年 新型脑膜炎球菌.pptVIP

研究背景 脑膜炎球菌 脑膜炎和暴发性败血症，引起流行性脑脊髓膜炎（流脑） 发病率30-50万/年, 20%CNS损伤；病死率约10% ，死亡数17.1万/年 13个血清群,主要致病菌群：A、B、C、Y、W135 流行情况： 地域分布极广，几乎遍及各大洲 各国间发病水平差异很大 发展中国家:A群 W135 发达国家：C/B，Y和W135增加 流行菌群变迁，耐药株流行，流行周期缩短 研究背景 我国的流脑发病情况 A群为主 C群暴发 Y和W135隐性感染 耐药菌株 课题设计概略 多糖疫苗： 创新点: 无苯酚的多糖提制工艺 A+C群Nm多糖疫苗 主要目标,2岁以上 A+C+W135+Y群多糖疫苗 特殊人群,潜在市场 结合疫苗： TI →TD抗原，提高免疫原性 多糖/降解多糖→衍化→与蛋白偶联→纯化→结合疫苗 A群Nm结合疫苗（已申报） A+C群Nm结合疫苗 2岁以下,具经济实力地区和人群 A+C+W135+Y群多糖结合疫苗 潜在市场 多糖疫苗——工艺设计 多糖疫苗——主要工作 C群发酵工艺建立与优化、100L中试 A群发酵工艺优化、100L中试 W135群发酵工艺建立 Y群发酵工艺初步研究 C群乙醇沉淀工艺建立与优化、30g粗多糖规模投料 A群乙醇沉淀工艺建立与优化、30g粗多糖规模投料 建立了W135群苯酚工艺 多糖疫苗——C群 多糖疫苗——A群 多糖疫苗——NMR检测 多糖疫苗——动物安全性 多糖疫苗——C群多糖原液稳定性 多糖疫苗——C群多糖原液稳定性 多糖疫苗——W135、Y群 多糖疫苗——小结 A、C群 完成培养工艺研究 完成乙醇法提制多糖工艺研究，已申请发明专利 进行100L培养与多糖提制工艺研究 相关的动物安全性研究、稳定性研究等 W135群初步进展 Y群难度大 结合疫苗 完成 工艺研究 质量标准建立 安全性研究 临床研究 申报工作 2006年获得临床研究总结报告 2007年申请新药证书 2009年临床研究现场核查 2010年3月上会 结合疫苗 结合疫苗 结合疫苗 新策略 多糖→降解→衍化→偶联 主要内容 降解工艺 C群流脑衍化工艺 偶联工艺条件优化 小鼠免疫原性 结合疫苗——A群 结合疫苗——C群 结合疫苗——小结 确定A、C群多糖降解工艺 确定C群流脑多糖衍化工艺 建立A、C群结合物制备工艺 下一步计划 多糖疫苗 与生产部门共同进行A/C群流脑培养和多糖提制的规模化试验，进一步优化和验证相关工艺。 优化W135群流脑的发酵工艺，进一步提高产糖量。完成乙醇沉淀法提制W135群多糖工艺研究并验证。 及时补充技术人员，有效开展Y群流脑的培养和多糖提制工作。 GE公司开发了层析法提制流脑多糖的工艺。 结合疫苗 优化工艺，提高回收率。 提高结合物原液的稳定性。 放大量进行结合物试制，确立工艺和质量标准。 进行液体疫苗成品的稳定剂研究。 在解决W135、Y群多糖的基础上开展结合疫苗研究。 谢谢！ 脑膜炎球菌疫苗的研制 第三研究室 2011年1月18日 发病率（/10万） A/C/Y/W135 多糖疫苗 结合疫苗 工作环境条件 工作人员防护 污水处理 清洁环保 高效率 低成本 可经呼吸道、皮肤和消化道吸收。 对皮肤、粘膜有强烈的腐蚀作用, 可抑制中枢神经系统或损害肝、肾功能。 水溶液比纯酚易经皮肤吸收 菌种 细菌培养 检定 多糖提制 建立相关检定方法 A/C群多糖质量符合2010年版规程要求 A/C群多糖NMR分析 A/C群多糖动物安全性检测 C/Y/W135群菌种建库 C群传代稳定性试验 A/C/Y/W135群16S rRNA、PorA、 PorB基因测序 A群 C群 初步建立了W135群Nm的培养工艺 采用苯酚法提制多糖，产量较低 正在试验乙醇法 初步探索Y群Nm的培养工艺，产量很低 A群流脑结合疫苗 A群流脑结合疫苗 临床研究结论： 在3月龄~5岁儿童中安全性良好，具有免疫原性 在同年龄段儿童中的免疫原性优于多糖疫苗 ？单价疫苗 ？加佐剂 ？临床研究在GLP实施之前 2010年3月20日上会 √工艺可行性 √质量标准 A群流脑结合疫苗 A/C群流脑结合疫苗 A群结合疫苗免疫小鼠产生高滴度抗IgG抗体，免疫2针显著高于1针 大分子和小分子制备的结合物免疫原性之间没有统计学差异 建立了稳定的降解工艺 保持多糖O-乙酰基完整 抗多糖IgG滴度显著高于市售疫苗 提示免疫记忆的形成 建立了稳定的降解工艺 保持多糖侧链基团完整 C群结合疫苗免疫小鼠产生高滴度抗IgG抗体 免疫2针后