真菌感染与实验室诊断进展(四川省人民医院检验科喻华).pptVIP

气道分泌物中分离出假丝酵母菌意义 ? 人类口腔正常定植菌，正常人20％－55％痰中可分离出假丝酵母菌属 ?假丝酵母菌肺炎少见 – 发病率大约0.23－4.5％ ? 25例ICU患者的尸体解剖研究： – 10例（40％）假丝酵母菌培养阳性 – 只有2例（8％）是真正的假丝酵母菌肺炎 ? 用肺泡灌洗液或毛刷作真菌计数,在24例103cfu/ml无一例是念珠菌感染 ? 实验室报告会增加唑类药物的应用和耐药性。 痰和BAL检查的诊断意义 ? 上气道念珠菌定植常见，气道分泌物（痰和BALF）培养阳性不能作为侵袭性感染的证据。 ? EORTC/MSG定义： 痰和BALF中丝状真菌和隐球菌镜检和培养阳性作为感染的微生物学证据，而念珠菌培养阳性（无论3次还是更多）只是定植。 镜检和培养方法 ?敏感性低 血培养：在肿瘤和血液病病人中，50%尸检证实深部念珠菌感染的病例血培养阴性。 ?培养结果阳性仅表示存在某种真菌，区分定植和感染困难 ? 培养时间长 ? 有些标本采集困难 近年来诊断的进展？ 胸部CT扫描 Pulmonary CT scan 非培养微生物检查技术 Non-culture based 非培养诊断的方法简介 ?真菌细胞壁成分 （1-3）-β- D-葡聚糖检测（G试验） ?真菌抗原检查 半乳甘露聚糖（galactomannan) 抗原（GM) 甘露聚糖(mannan)抗原 隐球菌荚膜多糖抗原（乳胶凝集试验） ?真菌特异的代谢产物（D-阿拉伯糖醇） ?真菌DNA的检测 曲霉菌半乳甘露聚（GM） 曲霉菌细胞壁上一种多聚糖抗原 可以从血清、脑脊液、胸水、BALF检测到 方法： ELISA（BioRad）：敏感性高 1ng/ml Latex agglutination： 15ng/ml 半乳甘露聚糖检测诊断侵袭性曲霉病(GM试验) Diagnosis of invasive aspergillosis using a galactomannan assay-a meta-analysis. Clin Infect Dis, 2006; 42:1417–27 O Marchetti. New Developments and Challenges in Diagnostics of Invasive Fungal Infections. 4th Trends in Medical Mycology. 1996-2005年27项研究的Meta分析 患者类型 样本量 敏感度(95%CI) 特异度(95%CI) 恶性血液病 2960 70% (62-77%) 92%(90-93%) 异基因HSCT 903 82% (70-90%) 86%(83-88%) 实体器官移植 224 22%-40% (3-60%) 84%(78-88%) 支气管肺泡灌洗液半乳甘露聚糖检测 O Marchetti. New Developments and Challenges in Diagnostics of Invasive Fungal Infections. 4th Trends in Medical Mycology. Galactomannan in bronchoalveolar lavage fluid-a tool for diagnosing aspergillosis in ICU patients. Am J Resp Crit Care Med, 2008; 177: 27-34 ICU曲霉病患者诊断的有效工具 BAL GM 阈值0.5 敏感度 88% 特异度 87% 血GM 阈值0.5 敏感度 42% 特异度 78% 110例ICU患者纳入分析，其中中性粒细胞减少患者仅占22% 合适的判定折点：1.0, 0.8,0.5? 在儿童的应用价值？ 食物中的GM可以被吸收，假阳性？ 哌拉西林/他唑巴坦治疗，假阳性？ 非血液病患者应用不多 抗真菌治疗对结果的影响？ 半乳甘露聚糖(GM)检测存在的问题 酵母菌、丝状真菌细胞壁成分 不仅检测曲霉菌，还可以检测念珠菌、镰刀菌、毛孢子菌、支顶孢属 不能检测：隐球菌和接合菌 美国FDA已批准，欧洲部分国家已注册 敏感性、特异性：90％左右 ?－D－葡聚糖（G试验）的价值 美国大多数研究限于念珠菌菌血症 其他真菌感染（侵袭性曲霉菌病）的研究资料少 假阳性：血液透析；接受血制品治疗（免疫球蛋白） 抗生素对结果的影响？？ ?－D－葡聚糖（G试验）的价值 1. Senn et al. 1,3-Beta-D-glucan antigenemia for early diagnosis of IFIs in