医院感染微生物学监测幻灯片.pptVIP

（1）在洁净度100级区域中进行，严格无菌操作 （2）采样后送检时间不得超过6h 样品保存于4℃，则不超过24h （3）如消毒因子为消毒剂，采样液中应加入中和剂 （4）采样面积，100cm2 （5）设好阳性、阴性对照  注意事项： 不推荐医院常规开展灭菌物品的无菌检查 可用破坏性方法取样的，应在100级超净工作台称取1～10g样品，放入装有10mL采样液的试管内进行洗脱，取洗脱液接种平皿进行菌落计数（cfu/g），必要时分离致病性微生物。 消毒医疗器材的检查方法 可整件放入试管进行洗脱的，用洗脱液浸没后震荡30s以上，取洗脱液接种平皿，进行菌落计数（cfu/件），必要时分离致病性微生物。 对不能用破坏性方法取样的医疗器材，应在100级超净工作台，用浸有无菌生理盐水采样液的棉拭子在被检物体表面涂抹采样，被采表面＜100cm2，取全部表面，被采表面≥100cm2，取100cm2，然后将采样棉拭子进行洗脱，取洗脱液接种平皿进行菌落计数（cfu/ cm2），必要时分离致病性微生物。 采样时间 消毒灭菌后 使用前 内窥镜消毒灭菌效果的生物监测 采样方法 监测部位为内镜的内腔面 用无菌注射器抽取50ml 含有相应中和剂的洗脱液 从待检内镜的活检口注入内镜（使用蠕动泵） 用无菌试管从活检出口收集注入的液体 2h内送检 检测方法 将洗脱液充分混匀 取洗脱液1.0ml接种平皿 将冷却至40℃-- 45℃溶化的营养琼脂培养基 每皿倾注15-20ml 36℃± 1℃恒温箱培养48h 计数菌落数（cfu/件） 将剩余洗脱液在 无菌条件下用滤过膜（0.45um）过滤浓缩 将滤过膜接种于凝固的营养琼脂平板上 置36℃± 1℃恒温箱培养48h 计数菌落数（cfu/件） 合格标准 消毒内镜 细菌总数≤20cfu/件 灭菌内镜 无任何细菌检出 采样时间 消毒灭菌后 使用前 呼吸机麻醉机等螺纹管消毒效果生物监测 采样方法 用蘸有相应中和剂的长柄棉签 在被检螺纹管内面反复涂擦 并同时转动棉签 剪去手接触的部位 将棉签投入10ml含相应中和剂的 无菌生理盐水试管 立即送检 检测方法 同物体表面微生物学的检测方法 结果计算 细菌总数（cfu/cm2）= 平板上的菌落数×稀释倍数 采样面积 采样面积 = 棉签涂抹采样的长度×螺纹管内周长 医院治疗用水的细菌学检测 血液透析相关治疗用水的细菌学监测 依据YY 0572《血液透析和相关治疗用水》进行检测 监测时间 最初监测应每周监测1次 连续2次监测结果符合要求后 改为每月1次 采样点 血液透析器与复用系统连接处 或尽可能接近此处 采样方法 用75%酒精擦拭采样口 酒精自然风干后打开采样口 在透析液连续流动1min后 用无菌试管接取样本3-4ml 检验方法 倾注法 将洗脱液充分混匀 取洗脱液1.0ml接种平皿 将冷却至40℃-- 45℃的胰蛋白酶大豆琼脂 每皿倾注15-20ml 35℃- 37℃孵育48h 48h后若呈阴性 延时培养至72h 计数平板上的菌落数 菌落总数(cfu/ml）=平板上的菌落数 结果计算 无菌操作取100ul样本 滴于培养皿表面 均匀涂抹 35℃- 37℃孵育48h 48h后若呈阴性 延时培养至72h 计数平板上的菌落数 涂抹法 菌落总数(cfu/ml）=平板上的菌落数×10 结果计算 透析用水细菌总数 合格标准 ISO 13959:2002 《血液透析和相关治疗用水》 ≤200cfu/ml ≤100cfu/ml 口腔科治疗用水的细菌菌落总数应≤100cfu/mL 口腔科治疗用水的细菌学监测 直接取治疗用水1mL接种平皿 37℃恒温箱培养48h 计数细菌菌落数。 检测方法 合格标准 血 液 透 析 液 内 毒 素 检 测 血液透析用水内毒素监测 最初每周监测1次 连续2次检测结果符合要求后 应至少每3月送检1次 国际标准ISO 13959:《血液透析和相关治疗用水》 水处理输出端内毒素含量应≤ 1EU/ml 血液透析器入口的输出点内毒素含量≤5EU/ml 样本 反渗水 透析液 采集方法 容器 专用无热源真空管 方法 用75%酒精擦拭采样口 酒精自然风干后打开采样口 1分钟后用无菌无热源注射器针头 深入采样口内 吸取样本3-4ml 用75%酒精消毒无热源真空管顶端 待酒精自然挥发后 将样品注入真空管内 （不可打开真空管上方的红色盖子） 实验方法 动态比浊法（仪器法） 注意事项 样本采集、保存、运送整个过程中 避免外来