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1、先从细胞复苏说起,养细胞不要循规蹈矩,书上说的是经典,但有时也需要灵活运用。一般要求37复苏细胞,我一般是使用39,融化了就马上把细胞拿走,细胞不会升温到37以上,这样复苏的时间更短,细胞受的伤害更小,有利于提高细胞存活率。2、复苏好的细胞是否要离心去除保护剂,要看你的细胞是不是对保护剂敏感,我一般是不离心的,直接放到培养皿里,加入新鲜培养液,待细胞贴壁后换培养液就行了,其实对细胞的处理过程越简单,对细胞的损伤就越小。3、关于培养液中是否要加双抗。开始养细胞时是加的,后来发现基本没有用。该污染的还是污染。而且双抗对细胞有毒性,如果细胞很脆弱,要尽量减少对它的伤害。4、关于污染。防止污
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