7.2 饲料中矿物元素分析-磷的测定幻灯片.pptVIP

饲料中矿物元素分析 — 饲料中磷的分析测定 黎观红 江西农业大学动物科技学院 * * 饲料中磷的测定 饲料中总磷的测定（钼黄比色法） 饲料中植酸磷的测定（三氯乙酸） * * 一、饲料中总磷量的测定（钼黄比色法） 一、原理 先将试样中有机物破坏，使磷游离出来，在酸性溶液中，用钒钼酸铵处理，生成黄色络合物—（NH4）3PO4?NH4VO3?16MoO3（磷－钒－钼酸复合体），在波长400nm下进行比色测定。 此法测得为总含磷量，其中包括动物难以吸收的植酸磷。 * * 一、饲料中总磷量的测定（钼黄比色法） 二、仪器设备及试剂 盐酸、硝酸、偏钒酸铵、钼酸铵、磷酸二氢钾；实验室用样品粉碎机或研钵、分样筛、分析天平、分光光度计、高温炉、坩埚、容量瓶、容量瓶或具塞比色管、刻度移液管、凯氏烧瓶。 1 盐酸　1＋1（V1＋V2） 2 浓硝酸 3 高氯酸 4 钒钼酸铵显色剂（避光保存，如生成沉淀则不能继续使用） 5 磷标准溶液（50μg/ml，用磷酸二氢钾配制，溶液中加入了3ml浓硝酸） * * 一、饲料中总磷量的测定（钼黄比色法） 三、测定步骤 （1）试样的分解 A、干法（不适用于含磷酸氢钙的饲料） B、湿法 C、盐酸溶解法（适用于微量元素预混料） * * 一、饲料中总磷量的测定（钼黄比色法） 三、测定步骤 （1）试样的分解 A、干法（不适用于含磷酸氢钙的饲料） 称取试样2～5g于坩埚中，精确至0.0002g，在电炉上小心炭化，再放入高温炉于550℃下灼烧3h（或测定粗灰分后连续进行），在盛灰坩埚中加入盐酸溶液10mL（1＋1，V+V）和浓硝酸数滴，小心煮沸约10 min，将此溶液转入100 ml容量瓶，冷却至室温，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，为试样分解液。 与测定钙的方法一致，只是盐酸溶液浓度不一样。 有研究认为，用测定钙后的分解液可直接用于测定饲料总磷。 * * 一、饲料中总磷量的测定（钼黄比色法） 三、测定步骤 （1）试样的分解 B、湿法 　　 称取试样0.5～5g于凯氏烧瓶中，精确至0.0002g，加入浓硝酸（GB623分析纯）30mL，加热煮沸，至二氧化氮黄烟逸尽，冷却后加入高氯酸（GB623分析纯）10mL，小心煮消沸至溶液无色,不得蒸干（危险！），冷却后加蒸馏水50mL，且煮沸腾驱逐二氧化氮，冷却后转入100mL容量瓶，用蒸馏水稀释至刻度,摇匀,为试样分解液。 研究认为，湿法是目前较为理想的、稳定的一种分解方法，分解完全，易于操作。准确度和优于干法。通风良好的情况下进行。 干法分解样品时，灼烧过程中，样品飞溅、灰化不完全等因素易引起较大的误差。 * * 一、饲料中总磷量的测定（钼黄比色法） 三、测定步骤 （1）试样的分解 C、盐酸溶解法（适用于微量元素预混料） 称取试样0.2～1g（精确至0.0002g ）于100 ml烧杯中，缓缓加入盐酸溶液10mL（1＋1，V+V）使其全部溶解，冷却后溶液转入100 ml容量瓶，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，为试样分解液。 * * 一、饲料中总磷量的测定（钼黄比色法） 三、测定步骤 （2）标准曲线的绘制 * * 一、饲料中总磷量的测定（钼黄比色法） 三、测定步骤 （2）试样的测定 准确移取试样分解液1～10 ml于50 ml容量瓶，加入钒钼酸铵显色试剂10 ml，用水稀释至刻度，摇匀，放置10 min。以0 ml溶液为参比，用10 mm比色池，在400 nm波长下，用分光光度计测得试样分解液得吸光度。用标准曲线查得试样分解液的含磷量。 * * 一、饲料中总磷量的测定（钼黄比色法） 三、测定步骤 （3）结果计算 式中： m－试样质量；V－试样分解液总体积； V1－比色测定时所移取试样分解液体积； a－由标准曲线计算所得的试样分解液含磷量，μg/50ml； 10－6－为从μg转化为g的系数。 V1 V × m α×10-6 P= * * 一、饲料中总磷量的测定（钼黄比色法） 四、影响因素（注意事项） （1）酸度的影响（配制磷标准溶液） 硝酸用量对被测物质的吸光度有较大的影响。当 1000mL 磷标准液加1+1 硝酸2－4mL 之间时，测得溶液吸光度不变。故本实验选择加入3mL硝酸。 （2）显色剂用量的选择 实验表明，显色剂用量在9.5