2016年艾滋病抗体检测技术幻灯片.pptVIP

局部紧急处理 局部压，挤，冲，洗，消 局部消毒：75%酒精，0.2%次氯酸钠，0.5%碘伏，0.2-0.5%过氧乙酸 眼睛，粘膜：冲洗 紧急报告 向所在单位有关领导 及早报告，作好处理 咨询与宣传 稳定情绪 了解全过程后分析感染可能性 提供相关知识 防止传播 向有关领导宣传，做好必威体育官网网址，妥善处理暴露者 风险评估 紧急处理的质量 决定服药方案 明确感染和措施效果 谢谢您的聆听 检测方法及程序 1 试剂：抗体夹心ELISA 方法，应使用经国家药品监督管理局批准注册的试剂。 2 样品：血清、血浆或病毒培养上清液。 3 方法：筛选试验、确证试验（中和试验）、定量检测（标准曲线法） 确证试验过程 P24 抗原的中和试验，用于排除筛选试验的假阳性。 待检样品先与中和剂（P24 抗原的抗体）共同孵育，如果样品中存在P24 抗原，中和抗体将与之结合形成复合物，而不能与固相载体上的捕获抗体结合。 然后，用这样处理过的样品重复筛选实验的步骤，同时做一孔未中和的原始样品对照。 将中和与未中和孔的OD 值进行比较，如果中和孔的OD 值下降50 % 以上，认为样品中的P24 抗原是真正的阳性；如果中和孔没有出现OD 值的下降，认为P24 抗原的反应性可能是假阳性，需要做RNA 检测或随访做进一步确证。 HIV核酸检测 核酸检测的意义 婴儿早期诊断 疑难样本的辅助诊断 遗传变异：分子流行病学调查、人群HIV遗传变异趋势 病程监控和预后 指导病毒治疗及治疗效果， 定性检测：提取、扩增、电泳 定量检测：商品检测系统 RT-PCR bDNA NASBA 集合核酸定性检测：对高度怀疑感染人群且抗体阴性的样品进行集合核酸检测，及时发现窗口期感染者 HIV核酸检测---HIV感染产妇所生儿童早期诊断检测流程 3个月12个月 尽快在不同时间采集2份血样 12个月则按抗体检测流程，若抗体为阳性，不能凭此判断阳性，应尽快在不同时间采集2份血进行核酸检测 第六部分 质量控制 抗体检测的室内质量控制 试剂盒内部对照：用于判断每次实验的有效性 室内质控品：监控检测的重复性而设置，可以是商品或自行配制 绘制质控图 质控图的分析及失控处理 快速试剂质控 内对照有效 外部对照：可采用商品或自制的，不能使用ELISA的外部质控品，可用本室保留阳性样本。 下列情况需做质控：更换批号、更换检测人员、更换包装、更换厂家。 可能隐患：运输包装、内盒或试剂盒损伤、单包装内存在混杂物质，标签错误缺失模糊，泄露，不适宜的存放条件等等。 开展条件：确认实验室-中国CDC能力验证，筛查实验室或筛查点-省级或市级能力验证。 质量保证 人员培训： 详细了上岗培训的内容 至少应包括艾滋病相关基础知识，艾滋病相关检测技术及管理要求，实验操作，质量保证和控制，生物安全 明确了培训类别：上岗培训和在岗培训 明确了培训的频度：复训，确证实验室每年至少一次，筛查实验室人员至少2年一次。 增加了CD4和HIV病毒载量检测的质量管理 质量保证 标准操作程序(SOP) 各级艾滋病实验室要建立覆盖主要工作内容的SOP文件应包括： 1、样品的接收、登记、处理、保存和运输 2、检测方法和步骤 3、试剂使用和保存 4、仪器的使用维护和校准 5、质量控制要求及程序 质量保证 标准操作程序(SOP) 6、结果解释与报告 7、必威体育官网网址程序 8、实验室数据、相关文件记录与保存 9、不确定样品追踪和处理 10、实验室安全防护及实验室的清理和消毒 SOP应有标题和编号、编写和修订日期和人员姓名以及各类相关的表格等信息。 质量保证 实验原始记录表 应按实验要求，设计实验操作原始记录表，标明空白对照、阳性对照、阴性对照、外部对照以及待检样品的位置，便于指导实验人员加样。同时应注明试剂厂家、测定方法、批号、效期、实验室环境温湿度、操作人员和复核人员姓名及检测日期。 质量评价 内部质量评价 外部质量评价 内部质量评价 本实验室组织的质量评价，应定期组织，应包括样品接受、检测、包存至发出报告的各个环节。 确证中心实验室应通过实验室认证认可，鼓励确证实验室或筛查实验室通过认可，或按照认可的有关条款建立质量评价机制 外部质量评价 职能工作考核：评价实验室质量保证 明确了现场抽查的百分比5~10% 列出了问卷调查的内容：省级考核至少应包括—人员培训及能力，环境条件，仪器设备使用及校准，管理型文件及试验记录，检测报告，试剂使用情况，样品接受