第5章 中药制剂中各类化学成分分析幻灯片.pptVIP

（二）理化性质： 1、性状：苷元为结晶性固体，苷为无定形粉末。 2、溶解性： ①游离苷元易溶于甲、乙醇，乙酸乙酯，乙醚及稀碱液中，不溶或难溶于水。游离苷元的母核上引入羟基，水溶性增加，且水溶性与羟基数目成正比，羟基甲基化，脂溶性增加，水溶性降低。 ②黄酮苷类易溶于热水，甲醇，乙醇。难溶或不溶于亲脂性有机溶剂，一般多糖苷在水中的溶解度大于单糖苷。 3、酸碱性： ①黄酮类化合物分子中具有酚羟基，故显酸性。 ②黄酮类化合物因为分子中的γ-吡喃酮环上的1-氧原子有未共用电子对，可接受质子而显弱碱性，与强酸结合生成钅羊（yang）盐，其极不稳定，可加水分解。不同类型的黄酮溶于浓硫酸时，常表现出不同的颜色，可用于鉴别。 4、显色反应：与分子中的酚羟基及γ-吡喃酮环有关。 ①还原反应： a盐酸-镁粉反应：将样品的甲醇或乙醇液，加入少许镁粉振摇，再滴加几滴浓盐酸，即可。 现象：泡沫处呈红色。 应用：黄酮，黄酮醇，二氢黄酮（醇） b四氢硼钠反应:样品的甲醇液，加等量2%NaBH4的甲醇液，加浓盐酸或硫酸，即可。 现象：溶液生成紫色或紫红色 应用：二氢黄酮类专属反应 ②与金属盐类试剂的络合反应:分子中具有3-羟基，4-羰基或5-羟基，4-羰基或邻二酚羟基的黄酮有此反应. a三氯化铝显色:样品的乙醇溶液加三氯化铝乙醇溶液显鲜黄色荧光。（含4’-OH或7，4’-OH显天蓝色荧光） b锆盐-枸橼酸反应:样品的甲醇液加2%ZrOCl2/MeOH,生成黄色锆络合物，说明有3-OH或5-OH。加2%枸橼酸，仍呈鲜黄色说明有3-OH，黄色溶液显著褪去，无3-OH有5-OH。 c醋酸镁显色:纸片上滴加样品液，喷醋酸镁甲醇液，加热干燥，UV观察。 现象：二氢黄酮（醇），天蓝色荧光。 黄酮、黄酮醇、异黄酮，显黄-橙黄-褐色荧光. 5、紫外光谱特征： ①黄酮类化合物具有2-苯基色原酮基本母核而具有特定吸收峰，常有两个较强的吸收带。 ②I带(300-400nm) →B环桂皮酰基 ③II带(240-285nm) →A环苯甲酰基 ④黄酮类化合物中加入一些位移试剂如甲醇钠、醋酸钠、三氯化铝等，可使最大吸收波长发生位移，选择性提高，还可消除杂质干扰，有利于含量测定。 三、定性鉴别： （一）显色反应： 1、盐酸-镁粉反应： 操作：将中药制剂用适当方法提取分离，制成供试品溶液。常用的提取溶剂有甲醇、乙醇或乙酸乙酯等；取样品液5～10mL，先加入少许镁粉，然后加入数滴盐酸，如果有黄酮、黄酮醇或其二氢化合物存在，数分钟后则可产生红色或紫红色。 注意：①为避免供试品溶液本身颜色的干扰，可观察泡沫颜色，泡沫为红色，示阳性。 ②查耳酮、橙酮等单纯在浓盐酸作用下也会发生颜色变化，须做空白对照。即不加镁粉只加浓盐酸观察，产生红色即表明溶液中有上述成分。 2、与金属盐类试剂的络合反应： 黄酮类成分能与金属离子如Al3+，Zr4+等产生络合作用，产生荧光或颜色加深等。 络合作用的条件是黄酮类成分必须具备下述条件之一，即5-羟基(a)、3-羟基(b)或邻二酚羟基(c)，(a)、(b)都是羟基与4位羰基共同与金属离子形成络合物。 （二）薄层色谱法：黄酮类成分最常用的定性分析方法。一般采用吸附薄层，常用的吸附剂有硅胶与聚酰胺，也可用纤维素、硅酸镁等。 硅胶色谱分离弱极性化合物较好 聚酰胺色谱分离含游离酚羟基的黄酮及其苷较理想 纤维素薄层则适用于分离多糖苷混合物 展开后的显色反应可采用在紫外光下观察荧光和喷显色剂相配合的方法。 操作步骤：供试液制备、对照液制备、准备薄层板、点样 、准备展开剂、展开、显色、色谱识别。 1、硅胶薄层色谱： 用硅胶分离黄酮成分，遵循正相色谱层析规律，化合物极性越强，所需溶剂的极性越大。 其Rf值顺序如下：RCH3RHROCH3R-O-糖ROH 常用的展开溶剂系统有： 甲苯-甲酸乙酯-甲酸(5∶4∶1)，分离黄酮甙元； 苯-甲醇(95∶5)，分离黄酮甙元； 苯-甲醇-乙酸(35∶5∶5)，分离黄酮甙； 氯仿-甲醇(8∶2)，分离黄酮甙元及甙； 苯-乙酸乙酯(7.5∶2.5)或苯-丙酮(9∶1)，分离黄酮甙元衍生物如甲醚或乙酸酯中性成分； 甲苯-甲酸乙酯-甲酸(5∶4∶1)，分离双黄酮成分。 展开剂系统中各组分的配比可根据薄层色谱的需要加以调整。 2．聚酰胺薄层色谱：聚酰胺薄层色谱用于分离含游离酚羟基的黄酮甙与甙元较好。由于各种黄酮类成分取代基团的性质、多少和位置的不同，与聚酰胺形成氢键的能力有所差异而得到分离（酚羟基越多Rf 越小）。 一般说来，聚酰胺薄层色谱展开剂中大多含醇、酸、水。常用的溶剂系统有：甲醇-水(8∶2)，分离黄酮甙元及甙，苯-丁酮-