第八章 疾病与人类健康-基因治疗幻灯片.pptVIP

基因治疗 概念 美国的联邦食品与药品管理局( FDA) 于1993 年给出的定义是: “基于修饰活细胞遗传物质而进行的医学干预。细胞可以体外修饰,随后再注入患者体内；或将基因治疗产品直接注入患者体内,使细胞内发生遗传学改变。这种遗传学操纵的目的：预防、治疗、治愈、诊断或缓解人类疾病” 1、体细胞基因治疗 ( somatic gene therapy) 治疗基因转移到体细胞内使之表达基因产物,以达到治疗目的； 只影响受试者本人,而与后代无关。 2、生殖细胞基因治疗(germline gene therapy) 将治疗基因转移到患者的生殖细胞或早期胚胎内的一种基因疗法； 永久地改变后代的遗传组成,其目的是要预防后代患特定的遗传疾病。 生殖细胞基因治疗是体细胞基因治疗的延伸与扩展； 各国均禁止将生殖细胞基因治疗用于临床； 我国于1993年制定了《人的体细胞治疗和基因治疗临床研究质控要点》，明确规定仅能进行体细胞基因治疗。 特点 　技术路线的多样性； 　学科的交叉性； 　高风险性； 高度的靶向性。 基因治疗发展经历的3个阶段 第一阶段：70年代－80末，准备时期 又被称为“禁锢时期” 第二阶段：1989－1995年，狂热时期 FDA于1989年批准基因治疗 正式临床试验 第三阶段：1996－现在，理性时期 目前中国有 “B型血友病治疗”、 “脑瘤自杀基因治疗”和 “Ad－P53” 已通过国家药审 进入临床试用 基因治疗的3Y原则 安全性(safety) 有效性(efficacy) 稳定性(stability) 伦理原则 1、最后选择原则 某种疾病在所有的疗法均无效或微效时。 2、安全原则 安全不仅仅针对个体，更重要的是针对人类。 3、知情同意原则 基因治疗尚处于实验阶段，必须让患者认识到基因治疗可能的危害 4、公正原则 目前，基因治疗只能用于治病救人 5、必威体育官网网址原则 患者的遗传信息，尤其是基因缺陷不泄露给外界 基因治疗中存在的技术难点 ①突变基因定位与定点修复技术未解决,不能去除或纠正异常基因。 ②目前的基因导入系统尚不成熟,存在结构不稳定、影响基因组的功能以及治疗基因难以到达靶细胞等隐患； ③转导的外源性基因在细胞内表达难以控制,有一定的随机性，有激活致癌基因或产生野生型病毒的潜在危害； ④无法保障干预生殖细胞基因而不对后代产生医源性的伤害。 常用病毒载体系统 反转录病毒 腺病毒 腺相关病毒 单纯疱疹病毒 （1）反转录病毒载体 RNA病毒, 基因组大小在8～11kb 之间； 以基因组RNA为模板反转录出双链DNA； 双链DNA能够随机整合到寄主细胞的染色体上, 随着寄主细胞的复制而复制。 1981年，Wei等构建了第1个反转录病毒载体；临床上应用最多的以小鼠白血病病毒为基本骨架构建的反转录病毒载体。 优点: 宿主细胞广泛, 能够感染不同生物种类的多种类型细胞; 能高效的感染分裂细胞, 感染率高达100%; 能使外源基因整合到宿主细胞染色体上。 新进展 1)慢病毒载体的研究和应用（HIV-1) 基因组中存在核定位信号序列, 它能够有效感染并整合到非分裂细胞和最终分化的细胞(除G0期) 2)人泡沫病毒 目前为止，尚未发现有疾病与人泡沫病毒相关 2）腺病毒载体 线性双链的DNA病毒, 基因组为36kb； 不整合到宿主细胞染色体上, 而是以染色体外成分存在； 上皮细胞、 角膜和消化道上皮细胞具有天然的嗜性； 与临床疾病相关的腺病毒通常较温和, 很少危及生命。 优点: 1) 人类是腺病毒的天然宿主, 所以比较安全; 2) 该病毒在体外稳定, 易于制备与纯化; 3) 宿主范围广, 既可感染分裂细胞, 又可感染非分裂细胞; 4)可原位感染, 特别是肺, 可经口服, 喷雾, 气管内滴注等多途径进行治疗; 5) 外源基因表达水平较高。 不足之处: 1) 它几乎可以感染所有的细胞, 因此缺乏特异性; 2) 不能整合到宿主染色体上, 所以不能持续表达所需产物, 表达时间短暂, 需重复给予载体制剂治疗; 3)因可能刺激免疫反应, 使反复治疗的效果会逐渐降低。 （3）腺相关（腺伴随)病毒载体 线性单链的DNA 病毒, 基因组在4.6kb; 繁殖依赖于辅助病毒-腺病毒和疱疹病毒。 生活周期有两个不同的胞内期: 1)缺乏辅助病毒时, 腺相关病毒感染宿主细胞,其基因组会整合到宿主细胞染色体上, 形成潜伏感染状态; 2)当有辅助病毒感染同一个细胞时, 腺相关病毒基因组DNA就会复制。 优点: 目前尚未发现该病毒在人体中致病, 所以