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1、DNA的复制 以原有DNA分子为模板按照碱基配对原则合成出相同分子的过程 2、转录 以DNA分子为模板,合成出与其核苷酸顺序相对应的RNA的过程 3、翻译 以mRNA为模板的蛋白质合成过程 4、mRNA的反转录与cDNA 反转录酶可以将mRNA反转录为DNA,即互补DNA,或cDNA。 Tips 积累分子生物学的基础知识 专研流行病与统计的专业知识 英文文献阅读 1)翻译 2)meta analysis 3)多看,多见不怪 Summary 苦学苦干 (珍惜点点滴滴的时间) 善学善干 (探索时时事事的疑点) 真学真干 (转化成自己的真才实干) Good luck to all of you! Thanks! * * 分子生物学基础 传统流行病学 分子流行病学 分子生物学 宏观 微观 宏观与微观相结合! Outline 核酸 DNA RNA(miRNA) 染色体 基因 中心法则 核酸 重要的生物大分子 实验室研究最多的标本类型 核酸:脱氧核糖核酸(DNA) 核糖核酸(RNA) 碱基 腺嘌呤A 鸟嘌呤G 尿嘧啶U 胸腺嘧啶T 胞嘧啶C 核苷酸的化学组成 DNA RNA 碱基 腺嘌呤(adennine,A) 鸟嘌呤(guanine,G) 胞嘧啶(cytosine,C) 胸腺嘧啶(thymine,T) 腺嘌呤 鸟嘌呤 胞嘧啶 尿嘧啶(uracil,U) 戊糖 脱氧核糖 核糖 磷酸 磷酸 磷酸 核酸具有吸收紫外线的特征,其最大吸收波长是260nm,蛋白质紫外最大吸收波长是280nm。 可用紫外分光光度计测核酸的浓度 还可通过测定在260nm和280nm的紫外吸收值 (A260/A280)估计核酸纯度。 纯DNA的比值1.8(1.7-2.0),纯RNA的比值2.0,蛋白质污染可使比值降低。 遗传信息载体—DNA 生物体的遗传信息主要贮藏在DNA DNA的一级结构 1)由A、T、C、G四种脱氧核苷酸通过3’、5’-磷酸二酯键连接而成的长链高分子多聚体 2) 走向:5’ → 3’ DNA的二级结构 DNA的碱基组成 1) A=T G≡C 2) A+G=T+C 3) 人基因组约有30亿个碱基对 DNA的二级结构 1) 碱基互补配对 2) 反向、平行、右手双螺旋结构 DNA的变性 在某些理化因素(高温、酸、碱)作用下,DNA分子互补碱基对之间的氢键断裂,DNA双螺旋结构松散,变成单链的过程。 DNA的复性 变性DNA在适当条件下,分开的两条单链按照碱基互补原则重新恢复双螺旋构想的现象,又称退火(annealing)。 RNA 主要负责DNA遗传信息的翻译和表达,分子量要比DNA小得多,大多为单链分子。 根据RNA的功能: 核糖体RNA (rRNA) 转运RNA (tRNA) 信使RNA (mRNA) mRNA mRNA 转录DNA上的遗传信息,并指导蛋白质的生物合成,是蛋白质的模板 与蛋白质合成的正确起始有关 增加mRNA的稳定性 rRNA tRNA 反密码子 氨基酸 新生肽链 核糖体 mRNA rRNA RNA总量的80%,核糖体的骨架,蛋白质的主要合成场所 tRNA RNA总量的15%,氨基酸受体(识别),携带活化氨基酸(转运) MicroRNA (1)长度为21nt左右核苷酸的内源性单链小分子RNA;(2)存在65nt左右的发夹结构前体;(3)基因座位在蛋白质基因间隔区;(4)其DNA序列在近源物种间高度保守。 miRNA具有十分重要的调控功能,它们主要参与基因转录后水平的调控 。能够通过与靶mRNA的3’UTR特异性的碱基配对引起靶mRNA的降解(植物)或者抑制其翻译(动物),从而影响了靶mRNA的表达。 目前发现miRNA是一个庞大的小分子调控RNA家族,广泛存在于各种动植物中,参与细胞增殖和分化、细胞凋亡、胚胎发育、形态建成以及疾病发生等一系列重要的生命过程。 Serum microRNA signatures identified in a genome-wide serum microRNA expression profiling predict survival of non-small-cell lung cancer. J Clin Oncol. 2010. 基因组结构—染色体 短臂p 着丝粒 长臂q DNA 染色单体 染色体 基本单位:核小体 核小体:DNA和组蛋白(组蛋白八聚体) 基因 基因是一段DNA分子,遗传信息贮
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