农药残留测定-固相萃取.ppt

农药残留测定样品前处理 —固相萃取 样品前处理 样品前处理在农残分析过程中是一个既耗时又极易引进误差的步骤。样品处理的好坏直接影响农残色谱分析的最终结果，因此改善和优化样品前处理方法是农残检测技术中提高分析测定效率的关键环节。 样品前处理主要包括目标分析物的萃取、净化、浓缩等前处理步骤的 目的： 减小杂质对待测物的干扰，以及对样品中的痕量待测组分进行富集。 净化 样品经有机溶剂萃取后,往往还含有很多杂质,可能影响组分测定,或污染色谱柱和检测器,应采取净化手段来净化试样。净化方法主要是磺化法和柱层析净化。 应用和研究较多的萃取净化技术如下 固相萃取法 固相萃取法是20世纪70年代在液固萃取和柱液相色谱的基础上发展起来的一种样品预处理技术。1980年以后,国外将此项技术扩展,用于气相色谱法分析农药残留量的样品前处理。由于其简便、经济，并且节省时间和有机溶剂,而得到广泛地认可。 据统计，固相萃取商品柱在20世纪90年代以来，一直以每年10%的速度增长，发展迅速。 主要制造商：美国的Supelco（色谱科 ）、Waters、 Alltech（阿尔泰克 ）、 Varian(瓦里安)、J.T.Baker(贝克 )； 德国Merck等公司。 固相萃取装置 固相萃取的机理 固相萃取法通常采用柱分离，它由柱管、筛垫、固定相三部分组成。 固相萃取技术的作用机理 利用物质在两相分配系数不同，当被分离物质在两相间作相对运动时，被分离物质在两相间进行连续分配，形成差速迁移，使分析物与干扰物达到分离。其中吸附剂作为固定相，流动相是萃取过程的溶剂或解析过程的有机溶剂。 固相萃取的主要类型 固相萃取的主要类型 1）反相固相萃取：所用的吸附剂是非极性的。吸附剂和目标化合物通常是非极性的或极性较弱的相互作用，如范德华力。 流动相：极性（水溶液）或中等极性；分离物质：中等到非极性物质。 2）正相固相萃取：所用的吸附剂是极性的。吸附剂表面的极性官能团与目标化合物的极性官能团之间相互作用，包括了氢键，偶极－偶极相互作用等。 流动相：非极性、中等极性。分析物质：极性、中等极性、非极性。 3）离子交换固相萃取：吸附剂与目标化合物之间的相互作用是静电吸引力， 适用于带有电荷的化合物（水溶液、有机溶液）。 流动相：具有离子强度的缓冲液 对于酸性化合物，如有机酸、无机阴离子、酸性蛋白等，一般采用阴离子交换SPE柱； 对于碱性化合物，如有机胺、金属离子、儿茶酚胺和碱性蛋白等，采用阳离子交换SPE柱。 固相萃取操作程序 1)活化 2)上样(吸附) 3)洗涤(去除杂质) 4)洗脱和收集目标化合物 固相萃取方法的建立 一、选择适当的保留方法： 可能的方法有两种：第一，被分析物不保留于填充床，而干扰物保留，如此纯化了样品。第二，被分析物保留于填充床，而干扰物不保留，或者在样品洗脱前先从填充床上洗脱。当样品需要浓缩时，常用此第二种方法。 二、选择适当的填料和填充床大小： 不同的填料类型提供不同的选择性。填料类型应最大地利用被目标化合物和样品中的干扰物的结构差异。选择有适当选择性的填料能获得最高回收率和最高纯度的样品提取物。当填充床的大小未经优化时，通常有回收率低的问题。填充床太大时会导致洗脱不完全，而填充床太小时会导致保留不完全，两种情况结果都是回收率比预期的低。 三、选择合适的调节、洗涤和洗脱溶剂： 必须注意各类溶剂相对于填料的洗脱强度。上样时的样品调节溶剂应是没有洗脱作用的“弱溶剂”，必须使用缓冲液来控制潜在的带电荷化合物的离子化程度。洗涤溶剂应将弱保留的干扰物洗脱，但是洗脱强度不应太强而导致被分析物洗脱。洗脱溶剂的强度应足够使被分析物在较小的体积下（1-2ml）完全洗脱。 固相萃取方法的建立 —填料的选择 固相萃取方法的建立 —分离溶剂的选择 应用举例—水中有机氯农药测定 C18(500 mg）固相萃取柱净化处理水样品： 固相萃取的特点 固相萃取处理过程中不使用大量互不相溶的溶剂，不产生乳化现象，提高了方法的回收率，重现性好。 它采用高效、高选择性的吸附剂，可以根据目标化合物与干扰物的性质选择多种分离模式，去除杂质，富集目标物，降低检岀限，提高分析的灵敏度和准确度。 样品预处理过程显著减少溶剂用量，所需溶剂只有液-液萃取法的 10%，并减少了杂质的引入，减轻了