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课件 糖化血红蛋白 ——检测与临床应用 概 述 糖尿病与糖化血红蛋白(Glycated hemoglobin,GHB) 糖尿病 糖尿病诊断与监测 主要内容 重点:糖化血红蛋白定义 了解:糖化血红蛋白类型 了解:糖化血红蛋白检测方法 重点:糖化血红蛋白临床应用 糖化蛋白 己糖(葡萄糖)糖基+蛋白质氨基酸基团 糖化血红蛋白 重点:概念:是血红蛋白与糖类经非酶促结合而成的,它的合成过程是缓慢的而且相对不可逆的,积累并持续于红细胞中,合成速率与糖的浓度成正比。 GHB在糖尿病监测中的特点: (1)与血糖值相平行。 (2)生成缓慢。 (3)一旦生成就不易分解。 (4)反应场所。 糖化血红蛋白类型 HbA 95-97%以上,HbA2(占2.5%),HbF(占0.2%) HbA0(未糖化部分) HbA HbA1(糖基化部分): HbA1a(a1-a2) HbA1b(b1-b3) HbA1c (葡萄糖结合) 糖化血红蛋白检测方法 一、免疫凝集法 原理: 利用血红蛋白β-链上糖基化的N末端的4-8个氨基酸糖化位点制备的单克隆或多克隆抗体直接测定。 许多同源的糖化血红蛋白变体也有相同的N末端结构,从而会对结果造成干扰。 二、离子交换HLPC法 原理: 根据血红蛋白β链N末端缬氨酸糖化后所带电荷不同。 在中性pH条件下,HbA1c携带电荷较少,可以与其它组分(HbA1a、HbA1b 、 HbF 、 HbA0 等)分开达到分离的目的。 三、亲和层析法 原理: 采用间氨基苯硼酸的琼脂糖珠。 硼酸具有与血红蛋白分子上葡萄糖可逆结合反应的性质,致使GHb选择性地结合于柱上,而非糖化血红蛋白及不稳定GHb、HbF被洗脱而分离。 除葡萄糖外,血液中所有的糖类都可与Hb相结合,因此该方法的检测结果为糖化血红蛋白总量,而不是HbA1c的含量。 临床应用 标本采集 参考值范围 平均血糖 4. HbA1c研究及其标准化 5. 临床意义 标本采集与保存: 静脉血:EDTA、草酸盐、肝素 放置:4℃ 可放置1周。 采集时间:不限 美国糖尿病协会(ADA)建议血糖控制满意且稳定的糖尿病患者至少1年测2次糖化血红蛋白;若血糖控制不满意且需调整方案者,应一年测4次。 平均血糖与HbA1c的关系 根据DCCT的数据,美国糖化血红蛋白标准化项目(NGSP)以及大型的临床试验研究ADAG ,得出的直线回归方程式可以将糖化血红蛋白值用来估计平均血糖值: MBG估计值=24.89×(HbA1c)-45.36 HbA1c研究稳定发展,是评价血糖控制的重要指标 几个大型的国际糖尿病研究都表明HbA1c与糖尿病并发症存在着线性相关。 临床意义 测定糖化血红蛋白的注意事项(一) 血糖波动较大,不能反映真正的血糖变化 测定糖化血红蛋白的注意事项(二) 糖化血红蛋白还受红细胞的影响,在合并影响红细胞质和量的疾病(如肾脏疾病、溶血性贫血等)时,所测得的糖化血红蛋白也不能反映真正的血糖水平。 小 结 糖化血红蛋白是人体血液中红细胞内的血红蛋白与血糖结合的产物。糖化血红蛋白越高表示血糖与血红蛋白结合越多,糖尿病病情也越重。糖化血红蛋白能够反映过去2~3个月血糖控制的平均水平 。 2.糖化血红蛋白与血糖的控制情况 4%~6%:血糖控制正常 6%~7%:血糖控制比较理想 7%~8%:血糖控制一般 8%~9%:控制不理想 >9%:血糖控制很差,慢性并发症发生发展的危险高 方法与原理 3. 测定GHb主要是利用GHb和GHb的物理化学性质的不同而进行的,目前主要的检测方法有5种: 离子交换高效液相色谱法- HbA1c的金标准、微柱法、电泳法、亲和层析法、免疫法 4. 临床意义 在糖尿病的筛查中有早期提示的价值。 在糖尿病的治疗中, HbA1C是评价血糖控制好坏的重要标准。 预示微、小血管并发症,估计糖尿病慢性并发症的发生与发展情况。 谢 谢! * 糖化血红蛋白相关概念 基于糖化血红蛋白与非糖化血红蛋白所带电荷不同: 离子层析法、电泳等 基于糖化血红蛋白上糖化基团的结构特点: 亲和层析、免疫法、离子捕获法等 正常参考值:4~6% 诊断界值:≥ 6.5 % 糖尿病高危人群:5.7 %~6.4 % 一般认为,糖尿病患HbA1c≤
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