抗生素抑菌实验实验报告.doc

抗生素抑菌实验实验报告 探究抗生素抑菌效果试验报告 实 验 报 告 实验目的：探究不同种类抗生素的灭菌效果 实验器材：培养皿，量筒，滴管，锥形瓶，显微镜等 实验药品：琼脂，牛肉膏，蛋白胨，????、????溶液，菌落培养液，氯霉素， 青霉素，硫酸庆大霉素等 实验基本原理： 一、 常用的抗生素的分类： 1.倍他-内酰胺类：（1）.V、阿莫西林、哌拉西林针；（2）.头孢类：如头孢氨苄、头孢拉定； 2.大环内酯类（红霉素类）：、罗红霉素、阿奇霉素、克拉霉素等； 3.喹诺酮类：诺氟沙星、氧氟沙星、左氧氟沙星等； 4.氨基糖苷类： 5.四环素类：土霉素、四环素、米诺环素，美满环素等； 6.氯霉素类抗生素：、甲砜霉素、无味氯霉素等 7.其他类：甲氧苄啶、磺胺嘧啶、克林霉素、呋喃唑酮等。 （本实验中选择生活中最常见的青霉素、氯霉素和硫酸庆大霉素） 二、抗生素抗菌的机理分类： 1.阻碍细菌细胞壁的合成。以这种方式作用的抗生素主要是β-内酰胺类抗生素（头孢菌素类）。 2.与细菌核糖体或其反应底物相互所用，抑制蛋白质的合成。以这种方式作用的抗生素包括四环素类抗生素、大环内酯类抗生素、氨基糖苷类抗生素（庆大霉素）、氯霉素等。 3.与细菌细胞膜相互作用，增强细菌细胞膜的通透性、打开膜上的离子通道，让细菌内部的有用物质漏出菌体或电解质平衡失调而死。 4.阻碍细菌DNA的复制和转录 5.影响叶酸代谢 实验步骤： ①用蒸馏水清洗用具并制作九只培养基。 ②适当稀释菌落培养基后，各取0.1ml菌液，使用涂布平板法分别接种到九只培养基上。 ③将九只培养基编号，并均分为A、B、C三组。 ④用滤纸剪出18个直径2cm的圆片，6个浸泡青霉素，6个浸泡氯霉素，6个浸泡硫酸庆大素。完成后贴在培养基上，每只培养基贴2片。 ⑤将做好标记的培养基培养一段时间，观察细菌生长情况。 ⑥取出平板，测量出抑菌圈的直径大小，并做好记录。 ⑦整理数据，得出结论。 结 果 统 计 表 （注：抑菌圈半径记为R1;圆片半径1cm记为R2） 实验结论: 硫酸庆大霉素抑菌效果最好，青霉素抑菌效果最差。 篇二：实验11-抗生素的抑菌试验 实验十一抗生素的抑菌试验 一 目的要求 1、掌握纸片法测定抗生素抗菌作用的基本方法 2、了解抗生素的抗菌谱 二 实验原理 抗生素是某些植物与微生物生长到对数期前后所产生的次生代谢产物，其在低浓度下可其它微生物生长具抑制作用或杀死作用的物质。抗生素对敏感微生物的作用机理分为抑制细胞壁的形成、破坏细胞膜的功能、干扰蛋白质合成及阻碍核酸的合成。 由于不同微生物对不同抗生素的敏感性不一样，抗生素的作用对象就有一定的范围，这种作用范围成为抗生素的抗菌谱，作用对象广的抗生素称为广谱抗生素，作用对象少的抗生素称为窄谱抗生素。而且当某种抗生素长时间用于敏感微生物生长后，即使同一种菌的不同菌株对不同药物的敏感性也常发生改变，甚至出现耐药菌株，亦即产生抗性菌株，则抗生素将失去对抗性菌株生长的抵制，只以采用新的抗生素才可能控制抗性菌株的生长与繁殖，因而不断开发新的抗生素是保健人类身体健康的重要工作。新抗生素产生菌的分离筛选应通过拮抗菌发酵，然后以发酵产物进行抗菌活性实验，根据实验结果而获得产新抗生素的菌株。微生物代谢产物的抗菌活性常以管碟法与纸法进行检测，根据透明抑菌圈的有无与大小作为依据。 三 实验器材 1、菌种 枯草杆菌、大肠杆菌。 2、培养基 MH（Mueller-Hintion）琼脂。 3、试剂 青霉素、链霉素。 四 方法步骤 1、无菌滤纸片 以孔径6mm打孔器将滤纸打为圆形纸片，放入培养皿内，121℃蒸汽湿热灭菌，100℃烘干2h。 2、抗生素溶液制备 将取适量青霉素、链霉素，以无菌水溶解。 3、指示菌悬浮液的制备 枯草杆菌、大肠杆菌斜面菌种分别以无菌水洗下菌苔细胞，到入无菌三角瓶内，制备适宜浓度的细胞悬浮液。 4、混菌平板制备 取批示菌细胞悬浮液1mL加入无菌培养皿内，再加入温度为43~45℃的PDA培养基或牛肉膏蛋白胨琼脂培养基20mL，立即振荡使细胞与培养基混合均匀，静置冷凝。 5、平板加抗生素溶液 将滤纸片在抗生素溶液中充分浸泡2min以上，然后将纸片放于混菌平板上，每皿呈三角形放3点，每点贴放纸片2张。 6、培养与观察 将平板放于每24h测量一次透明抑菌圈直径，共测量3次。 五 结果 1、实验结果 测量每个平板3个抑菌圈直径，计算每次测量各平板3个抑菌圈直径的平均值，结果填于表内。 表1 青霉素对供试菌的抑菌效果（抑菌圈直径：mm） 培养时间 菌种名 24 表2 链霉素对供试菌的抑菌效果（抑菌圈直径：mm） 培养时间 菌种名