动物细胞融合和单克隆抗体(终极浓缩版).ppt

？ ？ ？ ？ 再分化 ？ 植物细胞杂交技术利用什么原理？ 用什么方法可以诱导植物细胞融合？ 一、原理： 细胞膜具有流动性 细胞的全能性 二、诱导方式： 物理法、化学法 植物细胞杂交技术有什么用途？ 三、用途： 获得杂种植株 2.过程： 1、动物细胞融合的基本原理是什么？ 2、动物细胞融合的诱导方式是什么？与植物细胞融合的诱导方式有什么不同？ 不同DNA的两个细胞 融合 有丝分裂 两个完整的杂交细胞 灭活的病毒 ？ 这是什么？ ？ ？ 用灭活的病毒诱导动物细胞融合的过程 2.过程： ⑴.原理： 1、动物细胞融合的基本原理是什么？ 2、动物细胞融合的诱导方式是什么？与植物细胞融合的诱导方式有什么不同？ 与植物原生质体融合的基本原理相同，即细胞膜的流动性。 ⑵.诱导方式： 物理法： 电激、振动、离心 化学法： 聚乙二醇（PEG） 生物法： 灭活的病毒 例如：仙台病毒 打破生殖隔离，使远缘杂交成为可能； 广泛应用多个学科领域； 重要用途：制备单克隆抗体。 3.意义和应用： 动物细胞融合过程和植物体细胞杂交有何不同？ 植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较 细胞膜的流动性 细胞的全能性 细胞膜的流动性 去除细胞壁后诱导原生质体融合 使细胞分散后诱导细胞融合 物理（离心、振荡、电刺激） 化学（聚乙二醇） 物理、化学方法（同左） 灭活的病毒 获得杂种植株 ？ ？ ？ ？ 制备单克隆抗体 三、单克隆抗体 1、抗体是由何种细胞产生的？ 浆细胞（效应B细胞） 2、抗体是如何产生的？ B淋巴细胞 抗原 增殖分化成浆细胞 3、一种B淋巴细胞能产生几种抗体？ 一种 1、传统的方法得到的抗体具有什么特点？ 特异性差、产量和纯度都很低。 三、单克隆抗体McAb 1.概念： 　 由单个B淋巴细胞经过无性繁殖（克隆），形成基因型相同的细胞群，这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。 特点： 　 特异性强、灵敏度高 1、在体外培养的条件下，一个B淋巴细胞有没有可能无限增殖？ 不可能 2、我们学过的什么细胞具有这样的能力？ 癌细胞 3、有什么办法让B淋巴细胞也具有这样的能力？ 细胞融合 一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 骨髓瘤细胞（癌细胞）能无限增殖 杂种细胞 动物细胞培养技术 ２、实验原理： 动物细胞融合 单克隆抗体 既能产生特异性抗体，又能大量繁殖 播放科学家的单克隆抗体制备过程 注射抗原 B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 细胞融合、筛选 杂交瘤细胞 细胞培养 筛选，继续培养 足够数量的、能产生特定抗体的细胞群 体外培养 注射到小鼠腹腔 单克隆抗体 注意观察细胞的种类 诱导融合 选择培养基 筛选，继续培养 克隆能产生抗体的阳性细胞 体外培养否或小鼠腹腔内增殖 动物细胞融合 动物细胞培养 二、单克隆抗体 2、单克隆抗体制备过程----流程图 给小鼠注射特定的抗原蛋白 B淋巴细胞（免疫） 骨髓瘤细胞 杂交细胞 杂交细胞（ B-瘤细胞） 单克隆抗体 杂交瘤细胞 瘤-瘤细胞 B-瘤细胞 B-B细胞 2、单克隆抗体制备过程 二、单克隆抗体 (1）什么是免疫的小鼠?怎样对小鼠进行免疫？ (2)图中的B淋巴细胞有何功能？骨髓瘤细胞有何功能？杂交瘤细胞有何特点？ (3)怎样才能将B细胞与骨髓瘤细胞融合？ (4)融合后可能有几种类型的细胞? (5) 两次筛选的目的是什么？ (6) 培养杂交瘤细胞的方式有哪两种？ (7)制备过程中应用哪些细胞工程技术手段？ 四、单克隆抗体的应用 请同学们根据自己所收集的资料，谈谈单克隆抗体的应用。 １可用于作为诊断试剂：有准确，高效，快速的优点 ２可用于疾病治疗 ３可用于运载药物（作为运载对应疾病的药物的 “生物导弹“。） 　　　“生物导弹”＝单克隆抗体＋药物 细胞 骨髓瘤细胞 细胞融合 浆 筛选 瘤细胞 杂交 细胞培养 选出能产生特定抗体的细胞群继续培养 体外培养 体内培养 从培养液或小鼠腹水中取出 单克隆抗体 本节小结 两个过程 动物细胞融合过程 单克隆抗体制备过程 三个“一” 一个诱导细胞融合的新方法 一个新细胞 一个优势 ——灭活病毒 ——杂交瘤细胞 ——单克隆抗体特异性强、灵敏度高 的优势. 1、动物细胞融合和植物原生质体融合比较， 在动物细胞融合中有特殊性的是（ ） A、融合的原理 B、融合的优点 C、融合的诱导手段 D、融合的过程 2、动物细胞融合的目的中最重要的是（ ） A