第五章　紫外-可见分光光度法.ppt

第五章 紫外-可见分光光度法(UV-vis) 第一节 光谱基础 一、紫外-可见分光光度法定义： 1 仪器设备和操作都比较简单，价格 低，分析速度较快。 2 灵敏度较高。 3 有较好的选择性。通过适当地选择测 量条件，一般可在多种组分共存的体 系中，对某一种物质进行测定。 4 精密度和准确度较高。在仪器设备和其 他测量条件较好的情况下，其相对误差 可减小到1％一2％。 5 用途广泛。医药、化工、冶金、环境保 护、地质等诸多领域---已成为必不可 少的测试手段之一。 三、紫外-可见吸收光谱的产生 若用一连续的电磁辐射照射样品分子，将照射前后的光强度变化转变为电信号并记录下来，就可得到光强度变化对波长的关系曲线，即为分子吸收光谱。 四、光的吸收定律 朗伯—比耳定律数学表达式 透光度(透光率)T 3.摩尔吸光系数ε的讨论 （补充） 4、偏离朗伯—比耳定律的原因 （了解） （1）物理性因素 非单色光作为入射光引起的偏离 讨论: 讨论: A总 =A1 + lg2 - lg(1＋10－?εbc )  (2) 化学性因素 第五章 紫外-可见分光光度法 一、紫外-可见分光光度计的类型 二、构成 一、紫外-可见分光光度计的类型 3.双波长 （补充） 2.单色器 3. 样品室 玻璃 石英 第五章 紫外-可见分光光度法(UV-vis) 1、σ→σ＊跃迁 3、π→π＊跃迁 4、n →π＊跃迁 二、吸收带类型 1．R带:(由德语Radikal而来，是基团的意思) 由含杂原子的不饱和基团的n →π*跃迁产生 如：C＝O；C＝N；—N＝N— △E小，λmax250~400 nm，εmax100 弱吸收，禁阻跃迁。 播放 3．B带：(苯吸收带) 由π→π*跃迁产生，是芳香族化合物的主要特征吸收带，在230～270nm (λmax=254nm)之间出现精细结构吸收，又称 苯的多重吸收。 4．E带：(Ethyleneic Band) 由封闭共轭体系的π→π*跃迁产生，是芳香族化合物的特征吸收带。 E1 180nm εmax104 （常观察不到） E2 200nm εmax=7000 中强吸收 1、吸收光谱（吸收曲线） （补充） 吸收曲线的讨论： 四、溶剂对紫外-可见吸收光谱的影响 （2）极性溶剂对π→π*跃迁的影响 3、溶剂的选择 ⑴ 在溶解度允许的范围内，尽量选择低极性溶剂； ⑵ 应能很好地溶解试样，对试样应该是惰性的； ⑶ 溶剂的极限波长应小于试样的λmax。 第五章 紫外-可见分光光度法 一、共轭多烯伍德沃德－菲泽规则 一、伍德沃德-菲泽(Wood Ward-Fieser)规则 例5 共轭双烯基本值 217 4个环残基取代 　+5×4 　　 计算值 237nm（238nm） 例6 链状共轭双键 217 4个烷基取代 +5×4 2个环外双键 +5×2 　计算值 　　247nm（247nm） 例7 ?max =253(基数) +3×5(环的剩余部分) + 5 (环外双键) =273 nm 观察值?max=275 nm(?=10000) 第五章 紫外-可见分光光度法 一、显色反应的选择 二、显色反应条件的选择 三、共存离子干扰的消除 四、测定条件的选择 一、显色反应的选择 3.氧化还原显色反应 4.显色剂 二、显色反应条件的选择 三、共存离子干扰的消除 四、测定条件的选择 2.选择合适的参比溶液 参比溶液的选择一般遵循以下原则： 3.控制适宜的吸光度（读数范围） 最佳读数范围与最佳值 注意： 　　如果光度计读数误差为1％，