α，-岩藻糖转移酶基因转染对卵巢癌细胞生物学行为影响.docx

二、Ｍｅｔｈｏｄｓ１．ＥｘｔｒａｃｔｉｏｎｏｆＨＦＵＴ—ＨａｎｄｐｃＤＮＡ３．１：ｅｘｔｒａｃｔｅｄｐｌａｓｍｉｄａｃｃｏｒｄｉｎｇｔｈｅｄｉｒｅｃｔｉｏｎｏｆｃｅｌｌｐｈｅｃｔｔｒａｎｓｔｅｃｔｉｏｎｋｉｔ．ｔｏ２．Ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎａｎｄｒｅｓｉｓｔａｎｔｃｅｌｌｃｏｌｏｎｓｃｒｅｅｎｉｎｇ：ＲＭＧ—１ｗｅｒｅｔｒａｎｓ—ｆｅｃｔｅｄｂｙＨＦＵＴ—ＨａｎｄｐｃＤＮＡ３．１ｓｃｒｅｅｎｅｄｔｈｅｒｅｓｉｓｔａｎｔｃｌｏｎｅｗｉｔｈＧ４１８．ｗｉｔｈｃｅｌｌｐｈｅｃｔｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎｋｉｔ．Ａｎｄ３．Ｉｍｍｕｎｏｃｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ：ｔｈｅｔｒｉａｌｗａｓｃａｒｒｉｅｄｏｕｔａｃｃｏｒｄｉｎｇｔｏｔｈｅｄｉｒｅｃｔｉｏｎｏｆＳＡＢＣｋｉｔ．４．Ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎｏｆｃｅｌｌｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ：ｏｂｓｅｒｖｅｄｃｅｌｌｓｗｉｔｈｉｎｖｅｒｔｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅａｎｄＨＥｄｙｉｎｇ．５．Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ：ｄｒａｗｎｇｒｏｗｔｈｃｕｒｖｅｂｙＭＴＹａｎｄｃｅｌｌｃｏｕｎｔｉｎｇ．６．Ｓｏｆｔａｇａｒｃｕｌｔｕｒｅ：ｃｅｌｌｓ１４ｄａｙｓｌａｔｅｒ，ｃｏｕｎｔｅｄ．ｗｅｒｅｉｎｏｃｕｌａｔｅｄｉｎｄｏｕｂｌｅｌａｙｅｒａｇａｒｐｌａｔｅ，ａｎｄ７．ＡｎＭｙｓｉｓｏｆｃｅｌｌｃｙｃｌｅｂｙｆｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｒｙ：ａｆｔｅｒＰＩｄｙｉｎｇ，ｃｅｌｌｓｔｅｃｔｅｄｂｙｆｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｒｙ．８．Ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌａｎａｌｙｓｉｓｗｅｒｅｄｅ—ＳｔａｔｉｓｔｉｃａｌａｎａｌｙｓｉｓｗａｓｐｅｒｆｏｒｍｅｄｂｙｔｈｅＳＰＳＳｌ１．０ｐａｃｋａｇｅ．ＰｒｏｂａｂｉｌｉｔｙｏｆＰ＜０．０５ｗａｓｃｏｎｓｉｄｅｒｅｄｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌｌｙｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ．Ｒｅｓｕｉｔｓ１．ＥｘｔｒａｃｔｉｏｎＯ｛ＨＦＵＴ—ＨａｎｄｐｃＤＮＡ３．１２．１ｍｍｕｎｏｃｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ：ｔｈｅｐｏｓｉｔｉｖｅｒａｔｅｏｆＬｅｗｉｓＹｅｘｐｒｅｓｓｅｄｉｎＲＭＧ—Ｉ—ＨｉｓｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｉｎＲＭＧ—ＩａｎｄＲＭＧ—Ｉ—ｐｃＤＮＡ３．１，Ｐ＜０．０５．３．Ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎｏｆｃｅｌｌｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ：ＲＭＧ—ＩａｎｄＲＭＧ—Ｉ—ｐｃＤＮＡ３．１ｇｒｏｗｔｈｉｎｌａｍｅｌｌａｒｓｈａｐｅａｎｄｔｈｅｂｏｒｄｅｒｌｉｎｅｉｓｒｅｇｕｌａｒ，ｂｕｔｔｈｅｂｏｒｄｅｒｌｉｎｅｏｆＲＭＧ—Ｉ—ｉｔｉｓｉｒｒｅｇｕｌａｒａｎｄｃｅｌｌｓｓｕｐｅｒｐｏｓａｂｌｙ．ａｒｅｅａｓｙｔｏｓｈｅｄｆｒｏｍｃｕｌｔｕｒｅｆｌａｓｋａｎｄｇｒｏｗｌｙ．４．ＧｒｏｗｔｈＣＵｌＷｅ：ＲＭＧ—Ｉ—Ｈｇｒｏｗｓｆａｓｔｅｒｔｈａｎｔｈｅｏｔｈｅｒｔｗｏｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ－５．Ｓｏｆｔａｇａｒｃｕｌｔｕｒｅ：ｒａｔｅｏｆｃｌｏｎｅｆｏｒｍａｔｉｏｎ：ＲＭＧ—Ｉ—Ｈｉｓ３５％，ＲＭＧ—ＩａｎｄＲＭＧ—Ｉ—ｐｃＤＮＡ３．１ｗｅｒｅ１３％ａｎｄ１２％ｓｅｐａｒａｔｅｌｙ，Ｐ＜０．０５．．气．６．Ａｎａｌｙｓｉｓｏｆｃｅｌｌｃｙｃｌｅ：ｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈＲＭＧ—ＩａｎｄＲＭＧ—Ｉ—ｐｃＤ—ＮＡ３．１，ｐｅｒｃｅｎｔａｇｅｏｆＲＭＧ—Ｉ—ＨｃｅｌｌｓｄｅｃｒｅａｓｅｓｉｎＧ１ｐｈａｓｅａｎｄＧｏｐｈａｓｅａｎｄｉｎｃｒｅａｓｅｓｉｎＧ２ｐｈａｓｅａｎｄｉｎＭｐｈａｓｅ．ＤｉｓｃｕｓｓｉｏｎｓＴｈｅｇｌｙｃｏｃａｌｙｘｌａｙｅｒｏｆｍａｍｍａｌｉａｎｃｅｌｌｓｉｓｋｎｏｗｎｔｏｃｈａｎｇｅｉｎａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎｗｉｔｈｃｅｌｌｕｌａｒａｄｈｅｓｉｏｎ，ｒｅｃｏｇｎｉｚｅ，ｃａｎｃｅｒａｔｉｏｎ，ｉｎｖａｓｉｏｎａｎｄｍｅｔａｓｔａｓｉｓ．ＴｈｅｒｅａｒｅｓｕｆｆｉｃｉｅｎｔｅｖｉｄｅｎｃｅｓｔｈａｔＬｅｗｉｓａｎｔｉｇｅｎｓａｌｅｔｕｍｏｒ—ａｓｓｏｃｉａｔｅｄｍｏｌｅｃｕｌｅｓａｎｄｃｏｒｒｅｌａｔｅｄｔｏｈｉ。ｇｈｇｒａｄｅａｎｄｐｏｏｒｐｒｏｇｎｏｓｉｓｔｕｍｏｒｓ．Ｗｅｔｒａｎｓｆｅｒｒｅｄ理１．２一ＦＴｇｅｎｅｉｎｔｏＲＭＧ—Ｉｃｅｌｌｓａｎｄｃｏｎｓｔｒｕｃｔｅｄｃｅｌｌｕ—ｌａｘｍｏｄｅｌｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇｄ１．２一ＦｒｇｅｎｅａｎｄＬｅｗｉｓＹｈｉｇｈｌｙｆｉｒｓｔｌｙ．ＴｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＬｅｗｉｓＹｗａｓｆｏｕｎｄｔｏｉｎｃｒｅａｓｅｉｎＲＭＧ—Ｉ—Ｈｂｙｉｍｍｕｎｏｃｆｌｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ．ｂｉ—ｏｌｏｇｉｃＭｂｅｈａｖｉｏｒｏｆｗｈｉｃｈｃｈａｎｇｅｄ．Ｔｈｅｒｅａｓｏｎｓｏｆｔｈａｔｍａｙｂｅ：（１）ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎｓｏｆｇｌｙｃｏｓｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅｍａｋｅｔｕｍｏｒｃｅｌｌｓｅｓｃａｐｅｆｒｏｍｉｍｍｕｎｉｔｙ；（２）ｎｅｇａｔｉｖｅｃｈａｒｇｅｉｎ