食品中黄曲霉毒素快速检测方法.ppt

谢谢！ * * * * * 下载后自己可以取消此水印 * 食品中黄曲霉毒素快速检测方法-荧光法 Aflatoxin黄曲霉毒素 黄曲霉毒素由黄曲霉和寄生曲霉产生 天然存在主要有黄曲霉毒素 B1, B2, G1, G2 四种，主要代谢产物是黄曲霉毒素M1 已发现AF对农作物的污染以花生及其制品（如花生油、花生酱）、玉米、大米和棉籽为重。除此之外，坚果类如核桃、杏仁、椰肉、奶及奶制品、动物肝脏、干咸鱼及辣椒等也不同程度地受到黄曲霉毒素的污染 对肝有损害，国际肿瘤研究机构定为一级致癌物 黄曲霉毒素的化学性质 黄曲霉毒素的基本结构为二呋喃环和香豆素，在紫外线下，黄曲霉毒素B1、B2发兰色荧光，黄曲霉毒素G1、G2发绿色荧光。黄曲霉毒素M1是黄曲霉毒素B1在体内经过羟化而衍生成的代谢产物。黄曲霉毒素的分子量为312-346。难溶于水，易溶于油、甲醇、丙酮和氯仿等有机溶剂，但不溶于石油醚、己烷和乙醚中。一般在中性及酸性溶液中较稳定，但在强酸性溶液中稍有分解，在pH 9-10的强碱溶液中分解迅速。其纯品为无色结晶，耐高温，黄曲霉毒素B1的分解温度为268 oC。 Aspergillus flavus黄曲霉 Figure 4.1 Growth of Aspergillus flavus (yellow-green fungus) from two of five surface sterilized peanuts placed on a nutrient culture medium. 图4.1 五颗表面消毒的花生置于营养培养基中，其中两颗有长出黄曲霉（黄绿色霉菌） Photograph courtesy of R.J. Cole, USDA, ARS, National Peanut Research Laboratory, Dawson, Georgia. Aflatoxin B1黄曲霉毒素B1的化学结构式 黄曲霉毒素的毒性 1.一级致癌物质。 2.是氰化钾的10-20倍。 3.是砒霜的68倍 。 4.是农药1605、1059的28-33倍。 5. 是3，4-苯并芘的4000倍。 6.是二甲基亚硝胺的75倍。 动物慢性中毒的主要表现 1.肝功能变化：血清转氨酶、碱性磷酸酶、异柠檬酸脱氢酶、球胆白升高。血浆白蛋白、非蛋白氮降低。肝糖元及肝内维生素A含量下降。 2.肝组织学变化：肝细胞变性、坏死。可形成再生结节。胆管上皮增生及纤维化。有的动物可发生肝硬化。 3.其它症状：生长发育迟缓、体重下降、食物利用率降低、母畜不育或产仔少等。 黄曲霉毒素的急性毒性 各种动物对AFB1的敏感性依动物的种类、年龄、性别、营养状况等不同而异。动物的AF中毒主要表现为食欲不振、体重下降、生长迟缓、繁殖能力降低、产蛋及产奶量减少等。中毒病变主要在肝脏，表现为肝细胞变性、坏死、出血、胆管增生等。急性中毒后期，动物出现体温升高、血性腹泻、心脏出现出血瘀点和淤斑、胆囊壁增厚、门脉周围纤维化、肝淋巴结节形成及空泡形成、胆管增生等。此外动物抵抗力降低，对细菌、病毒及寄生虫疾病更敏感。 Aflatoxin B1（致癌性） Courtesy of D.P.H. Hsieh, University of California, Davis. Drawing by G. Hedberg, USDA, ARS, National Animal Disease Center, Ames, Iowa. Aflatoxin B1 binds to DNA at the guanine base in liver cells, corrupting the genetic code that regulates cell growth. Out-of-control cells grow into tumors that eventually become cancerous. 黄曲霉毒素 B1同肝细胞DNA的鸟嘌呤碱基结合，使得控制细胞生长的基因代码发生错误，从而使细胞生长失控，成为癌性肿瘤。 GB2715-2005 中国粮食卫生标准真菌毒素限量指标（μg/kg） 黄曲霉毒素B1: 玉米≤20， 大米≤10， 其它≤5 脱氧雪腐镰刀菌烯醇（呕吐毒素DON）: 小麦、大麦、玉米及其成品粮 ≤1000 玉米赤霉烯酮：小麦、玉米≤60 赭曲霉毒素A： 谷类、豆类≤5 黄曲霉毒素分析方法 1薄层色谱法TLC 2酶联免疫吸附法ELISA 3免疫亲和柱净化、荧光计快速筛选定量分析法（溴衍生） 4HPLC反相色谱法+亲和柱净化+荧光检测器 （衍生方式：柱前TFA三氟乙酸、柱后TFA、柱后碘、柱后电化学、柱后光化学 免疫亲和柱净化-荧光计快速检测方法 美国VIC