实验性肾功能不全(zdl-new).ppt

了解实验性肾功能不全动物模型的复制方法。 观察升汞中毒家兔的一般状态，尿的变化，血浆尿素氮水平以及肾脏大体形态改变。 根据实验指标，分析讨论急性肾功能不全的病理生理变化。 观察指标 实验步骤 腹腔注射20%乌拉坦5ml/kg 方法： 左下腹腹白线旁1cm处进针， 针头与腹壁呈45度， 进针时有落空感，回抽时无血和肠内容物。 效果判定：肌肉松弛，自然卧倒， 眼睑反射迟钝，钳夹皮肤无反应 固定、备皮 剪刀平贴皮肤剪毛根部，切忌提起被毛剪，以免剪破皮肤 3. 膀胱插管收集尿液 下腹部切口，分离组织，暴露膀胱 注射器抽膀胱内尿3ml，备用 荷包缝合（膀胱无血管区） 膀胱插管 4. 左颈总动脉插管 5. 尿液镜检，计数（ 10个视野） 6. 尿蛋白定性检查 取尿液3ml于试管中 酒精灯上加热至沸腾 若混浊，加入5%醋酸3-5滴 再煮沸 尿变清，尿内有尿酸盐 混浊加重，尿中有蛋白 7. 血浆尿素氮测定 原理：血液中尿素在强酸条件下与二乙酰-肟和氨硫脲（DAM-TSC）共煮沸，生成红色复合物，颜色深浅与尿素氮含量成正比例关系，用分光光度计测定OD值，可计算出尿素氮含量。 ③ 各管加好混匀后置沸水锅中煮沸10min，流水中冷却3min后测OD值（520nm波长）,先以空白管调零，再读取测定管值； ④ 计算： 8. 形态学观察 ①将正常对照及中毒家兔处死（耳缘静脉注入空气5~10ml）,取出肾脏； ②观察并比较两组家兔肾脏的大体形态，如体积大小，表面色泽，皮质条纹及色泽等。 实验报告的书写 实验目的 实验步骤（简明扼要） 实验结果 分析讨论 实验性急性肾功能不全 武大医学院病生教研室 张德玲 急性肾功能不全 （acute renal insufficiency, ARI） 定义： 各种病因引起双侧肾泌尿功能急剧降低，导致机体内环境出现严重紊乱的病理过程。 主要表现： GFR下降，少尿或无尿 尿成分改变（蛋白，细胞，管型） 氮质血症，高钾血症 代谢性酸中毒 发病机制：各种病因导致肾血流动力学异常和肾小管损伤。 实验目的 实验模型复制原理 肾毒物HgCl2引起家兔肾小管变性坏死，导致严重的肾功能不全。 兔尸体解剖 颈动脉插管 膀胱插管 手术操作 血浆尿素氮水平 血液 氮质血症 肾脏色泽、体积、皮质条纹等 肾脏 肾脏形态改变 蛋白尿、血尿和管型 尿成分的改变 尿量 尿液 GFR下降、尿量下降 指标 对象 临床变化 1. 复制模型（了解内容） 实验组 1% HgCl2 肌肉注射1.2ml/Kg 24h 对照组0.9% NaCl 肌肉注射1.2ml/Kg 24h (1)称重麻醉: 腹腔注射20%乌拉坦，5ml/kg 2. 手术及操作 剑突 耻骨联合 称重麻醉 颈部正中：甲状软骨-胸骨上缘 切口｛ 下腹正中：耻骨联合上1-5cm 分离: 胸骨舌骨肌与左侧胸锁乳突肌 交汇的深部的颈A鞘内。 抗凝 耳缘静脉 1％肝素（1ml/kg） 插管 左颈总动脉 迷走神经 颈内静脉 胸骨舌骨肌 胸锁乳突肌 分离 左颈总动脉插管 插管远端用血管钳夹闭 结扎远心端，夹闭近心端 远心端，45o剪口，约为管径的1/2 朝心脏方向插管 2~3cm并固定 管型 （低倍镜） 细胞 （高倍镜） 　 　 　 　　 　　 　　 　 0.5 ＋＋＋＋ 絮状浑浊 0.2~0.5 ＋＋＋ 浑浊或少量碎片 0.05~0.2 ＋ ＋ 乳样浑浊　 0.01~0.05 ＋ 轻度白色浑浊 0.01 －　 清晰 蛋白含量（g%） 等级 程度 方法 ① 每组自颈总动脉取血10ml到离心管,离心,3000rpm 10min,吸出上层血浆置于干净试管中备用； ② 按下表加入试剂： 4.0 4.0 4.0 酸混合液 0.5 0.5 0.5 DAM-TSC - 0.4 - 尿素氮标准液Ⅱ 0.5 0.1 0.5 水 0.02 - - 血浆 测定管(A/B/C/D) 标准管 空白管 试剂（ml） 测定管光密度(Du) 标准管光密度(Ds) ×0.002× 100 0.02 = Du Ds ×10 血浆尿素氮(mg%)= 实验流程概