林木病理学课程.doc

安徽农业大学林学与园林学院 2012年11月 实验注意事项 林木病理学实验的目的是使学生从感性上认识病害的症状、病害发生规律、主要病原真菌、细菌、病毒、线虫的形态特征等相关知识，掌握病害诊断、病原分离、纯化、接种、鉴定等病理学研究的常规方法和技术同时，结合实验课程内容培养学生科学的思维方法 1、熟悉病原真菌营养体的形态特征。 2、理解真菌菌丝组织体的变形体的主要类型与作用、繁殖特点及孢子类型。 二、实验方法 1、通过显微镜观察玻片标本； 2、借助放大镜或肉眼观察盒装标本。 三、实验内容 （一） 病原真菌的营养体 真菌的生长和发育先是经过一定时期的营养生长阶段，然后进入繁殖阶段，真菌营养生长阶段的菌体称为营养体。典型的营养体为纤细和多枝的丝状体，常交织成团，称为菌丝体，每一根丝状体称为菌丝。 1、无隔菌丝： 低等真菌的菌丝通常无隔膜，是一个单细胞、多核、带分枝的丝状长管。观察匍枝根霉或毛霉的纯培养菌丝。方法是：在干净的载玻片中央滴一滴蒸馏水，用解剖针挑取试管（平皿）内菌丝少许置于水滴中，然后轻轻盖上玻片置于显微镜下观察。 2、有隔菌丝： 除低等真菌外，大多数真菌的菌丝都是有隔膜的，将菌丝分成多个细胞，有的真菌在生横隔处稍显细溢。用同样的方法，挑取试管（平皿）半知菌纯培养菌丝制成临时玻片标本镜检。 （二）病原真菌的菌丝组织体 真菌的菌丝体在一定的条件下可以形成特殊的结构，如菌核、子座和菌索等，称为菌丝体的变态。这些结构在真菌的繁殖、传播和抵抗不良环境方面有很大的作用。 1）菌核 菌核是由菌丝紧密交织而形成的休眠体，呈颗粒、块状、球形或不定形。其大小不一，小的如菜籽、鼠粪，大的像拳头。初为白色或浅色，成熟后呈褐色或黑色。菌核对高温、低温和干燥的抵抗力很强，是真菌渡过不良环境的结构。当环境条件适宜时，菌核可以萌发产生菌丝体或长出产生孢子的结构，但一般不直接产生孢子。 2）子座 子座是菌丝或菌丝与部分寄主组织紧密结合形成的，不经过休眠直接产生1至多个子实体。子座形状多样，一般为垫状，也有柱状、棒状、头状等。子座成熟后，在其表面或内部形成产生孢子的结构，子座也有渡过不良环境的作用。 3）菌索 一些高等真菌的菌丝体相互缠绕形成的绳索状物，外形与高等植物的根系相似，也称为根状菌索。菌索在环境条件不适宜时呈休眠状态，当环境条件适宜时可以恢复生长，起蔓延和侵入的作用。 （三）病原真菌的繁殖体 绝大多数真菌经过一定的营养生长后便转入繁殖阶段，真菌的繁殖方式分无性和有性两种，分别产生无性孢子和有性孢子，孢子是基本繁殖单位。真菌的无性孢子相当于高等植物的块茎、鳞茎、球茎等无性繁殖器官；有性孢子相当于高等植物的种子。 1、无性繁殖体 无性繁殖指不经过性细胞或性器官的结合直接从营养体上产生孢子，这种孢子称为无性孢子。如果条件适宜，在一个生长季节中无性孢子可以重复产生多次，在较短的时间内使真菌迅速繁殖、蔓延和扩散，所以真菌的无性孢子是寄主植物生长期间的主要侵染来源。常见的无性孢子有以下几种： 1）游动孢子 产生于孢子囊中的内生孢子，球形、洋梨形或肾形，有1 ~ 2根鞭毛，能在水中游动。鞭毛菌亚门的真菌常产生这种类型的孢子。 2）孢囊孢子 产生于孢子囊中的内生孢子，没有鞭毛，不能游动。接合菌亚门的真菌常产生这种无性孢子。 3）芽孢子 细胞以出芽方式形成的孢子。细胞首先产生小突起并逐渐膨大，继而与母细胞相连处的细胞壁缢缩，最后脱离母细胞独立成为新个体。以这种方式形成的孢子，称为芽孢子，如芽殖酵母菌的孢子。 4）厚垣孢子 菌丝中个别细胞膨大，细胞壁变厚，细胞质浓缩形成圆形或椭圆形的厚壁孢子，称为厚垣孢子。它产生在菌丝的中间或顶端，有的表面具刺或瘤状突起。厚坦孢子抗逆性强，能抵抗不良的环境条件，具有越冬的功能。 5）分生孢子 由菌丝分化长出特殊的产孢短枝（分生孢子梗），在其顶端或侧面形成的孢子，叫分生孢子。大多数分生孢子是外生的，成熟后脱落，由风或雨水传播；分生孢子的种类很多，它们的形态、大小、色泽、形成和着生的方式都有很大的差异。不同真菌的分生孢子梗，有散生的、丛生的，或聚生在一定的组织结构中。产生分生孢子梗和分生孢子的垫状、盘状或球状（或瓶状）结构，分别称为分生孢子座、分生孢子盘或分生孢子器。分生孢子是真菌最常见的一种无性孢子。 2、有性繁殖体 真菌的有性繁殖是通过性细胞（配子）或性器官（配子囊）结合而进行的，这个过程要经历质配、核配和减数分裂三个阶段，由此产生的孢子称为有性孢子。有性孢子可分为两大类型：一类是两性细胞结合后产生细胞核为双倍体的厚壁休眠孢子，如卵孢子和接合孢子。另一类是两性细胞结合产生细胞核为单倍体的薄壁非休眠孢子，如子囊孢子和担孢子。常见的有性孢子有下列四种： 1）卵孢子 是由两个