高中生物总复习 专题一微生物的培养与应用课件 新人教版选修1.ppt

专题一　微生物的培养与应用 一、微生物的培养 (一)培养基 1．概念：人们按照微生物对 的不同需求，配制出的供其 的营养基质。 2．营养构成：一般都含有水、 、氮源、 、生长因子，还需满足不同微生物对pH、特殊营养物质以及O2的要求。 (二)无菌技术 1．消毒 (1)特点：使用较为 的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和 )。 (2)常用方法：煮沸消毒法、 、化学药剂消毒法。 2．灭菌 (1)特点：指使用强烈的理化因素杀死物体内外 包括芽孢和孢子。 (2)常用方法：灼烧灭菌、干热灭菌、 灭菌。 (三)微生物培养的基本技术 1．配制培养基 称量→混合→溶化→调pH→分装→包扎。 2．灭菌：加水→加培养基→密封→排冷气→维持压力→取出倒平板(或搁置斜面)。 3．接种 (1)接种过程：洗净双手→点燃酒精灯→接种→贴标签。 (2)接种工具：包括 、涂布器。 (3)接种方法：平板划线法、 法。 (4)注意事项：整个操作过程都要在 旁完成。 4．培养：接种后的培养皿放入恒温箱内培养。 (四)菌种保藏 1．临时保藏 (1)操作：采用固体斜面培养基，菌落长成后，放入4℃冰箱中保藏，以后每3～6个月，转移一次新的培养基。 (2)缺点：保存时间不长，菌种易被污染或产生变异。 2．长期保存法：甘油管藏法，放在－20℃下保存。 二、微生物的应用 (一)土壤中分解尿素细菌的分离与计数 1．菌种筛选 (1)培养基： 。 (2)特点： 是唯一氮源。 2．统计菌落数目 (1)计算方法 ①稀释涂布平板法。 ② 。 3．设置对照 (1)对照实验：是指除了 外，其他条件都相同的实验。 (2)主要目的：排除实验组中 对实验结果的影响。 (二)分解纤维素的微生物的分离——纤维素分解菌的筛选 1．土壤取样：选择富含纤维素的环境。 2．将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上 (1)制备鉴别培养基：主要碳源CMC—Na。 (2)刚果红染色法。 ①先培养 ，再加入刚果红进行颜色反应。 ② 时加入刚果红。 3．进一步鉴定 (1)为确定得到的菌是否是纤维素分解菌，还需进行发酵产纤维素酶的实验。 (2)测定方法一般是对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的 进行定量测定。 一、微生物的培养 (一)微生物的实验室培养 1．培养基 (1)概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。 (2)分类和应用 (3)培养基配方及营养要素 基本营养要素：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐。 此外还要满足不同微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的需求。 【特别提醒】(1)微生物最常用的碳源是糖类，尤其是葡萄糖；最常利用的氮源是铵盐、硝酸盐。(2)对异养微生物来说，含C、H、O、N的有机化合物既是碳源，又是氮源、能源。(3)有些培养基不需要添加特殊营养物质，生物自己能合成，如大肠杆菌能合成某些维生素，作为特殊营养物质。(4)制备：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。 2．无菌技术 (1)消毒和灭菌的区别 【特别提醒】用酒精消毒时，70%的酒精杀菌效果最好，原因是：浓度过高，使菌体表面蛋白质凝固成一层保护膜，乙醇分子不能渗入其中；浓度过低，杀菌力减弱。 (2)无菌技术主要操作要求 a．实验前应对操作空间、操作人员消毒，对所用器具和培养基灭菌。 b．实验进行时需在酒精灯火焰周围无菌区操作，另外要避免已灭菌处理材料再次污染。 (二)纯化大肠杆菌以及菌种的保藏 1．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基：计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。 2．纯化大肠杆菌 (1)原理：在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其长成单个的菌落，这个菌落就是一个纯化的细菌菌落。 (2)方法：平板划线法、稀释涂布平板法。 平板划线法是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面；稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。 3．菌种的保藏 (1)短期保存：固体斜面培养基上4℃保存，菌种易被污染或产生变异。 (2)长期保存：－20℃甘油管在冷冻箱中保藏。 【特别提醒】平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的温度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发；又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。 解析：灭菌是指杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子，而消毒仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子)。 答案：B 二、土壤中分解尿素的细菌