基本工具及基本操作程序.ppt

【P362,9】已知SARS是由一种RNA病毒感染所引起的疾病。SARS病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原，在SARS病人康复后的血清中有抗S蛋白的特异性抗体。某研究小组为了研制预防SARS病毒的疫苗，开展了前期研究工作，其简要的操作流程如下： (1)实验步骤①所代表的反应过程是 。 (2)步骤②构建重组表达载体A和重组表达载体B必须使用限制性内切酶和 酶，后者的作用是将 用 限 制 性 内 切 酶 切 割 的 和 连接起来。 (3)如果省略步骤②而将大量扩增的S蛋白基因直接导入大肠杆菌，一般情况下，不能得到表达的S蛋白，其原因 是 S 蛋 白 基 因 在 大 肠 杆 菌 中 不 能 ，也不能 。 逆转录 DNA连接 载体 S蛋白基因 复制 合成S蛋白基因的mRNA (4)为了检验步骤④所表达的S蛋白是否与病毒S蛋白有相同的免疫反应特性，可用 与 进行抗原—抗体特异性反应实验，从而得出结论。 (5)步骤④和⑥的结果相比，原核细胞表达的S蛋白与真核细胞表达的S蛋白的氨基酸序列 (相同或不同)，根本原因是 。 大肠杆菌中表达 的S蛋白 SARS康复病人血清 相同 表达蛋白质所用的基因相同 考点二　基因工程基本操作程序 考点一　基因工程的理论基础和基本工具 1、全球性的生态环境问题主要包括哪些方面？ 2、生物多样性包括哪些层次？ 3、生物多样性的价值一般包括哪几个方面？请举例说明。 4、人类的必然选择是什么？ 专题1　基因工程 Ⅱ Ⅱ 1、基因工程的理论基础和基本工具 2、基因工程基本操作程序 能力要求 考纲内容 考点一　基因工程的理论基础和基本工具 1．基因拼接的理论基础 (1) 是生物的主要遗传物质。 (2)DNA的基本组成单位都是 。 (3)双链DNA分子的空间结构都是规则的 结构。 DNA 四种脱氧核苷酸 双螺旋 2．外源基因在受体内表达的理论基础 (1) 是控制生物性状的独立遗传单位。 (2)遗传信息的传递都遵循 阐述的信息流动方向。 (3)生物界共用一套 。 3．基因工程的基本工具 (1) 限 制 性 核 酸 内 切 酶：切 割 DNA 的 工 具 是 ，又称 。这类酶主要是从 中分离纯化出来的，能识别 分子中 ，并且使每一条链中特 定 部 位 的 两 个 核 苷 酸 之 间 的 断开，使其形成 或 。 基因 中心法则 遗传密码 限制性核酸内切酶 限制酶 原核生物 双链DNA 特定的核苷酸序列 磷酸二酯键 黏性末端 平末端 (2)DNA连接酶：常用的DNA连接酶有 (3)载体：携带目的基因进入受体细胞 条件：能在宿主细胞中保存下来并大量 ，有一个至多个 切割位点，有特殊的遗传 ，便于筛选。 复制 限制性核酸内切酶 标记基因 种类： (常用)、λ噬菌体的衍生物、 。 质粒 是 能 够 自 主 复 制 的 很 小 的 双 链 环 状 分子。 作用：(1)作为运载工具，将