大肠菌群的测定-细菌菌落特征.doc

大肠菌群的测定-细菌菌落特征 细菌菌落分布特征 表述词： 大小;直径用毫米表示，1mm左右为小菌落，2-3mm为中等大小菌落，3mm以上为大菌落 形状：点状，圆形，卵圆形，不规则形状 边缘：整齐，锯齿状，卷发状 表面：凸起，扁平，中心凹陷，光滑，皱纹。湿润。干燥 结构：均质性，颗粒状 颜色：无色，包色，灰白色，红色，柠檬色，黄色，金黄色，绿色 透明度：透明，半透明，不透明 其他：观察菌落周围的溶血现象 手指消毒前后细菌的采样培养结果： 1）消毒前：仅出现2个菌落，较小；乳白色、光滑、湿润、有光泽、圆形。 革兰氏染色结果：G-，杆菌 2）消毒后：无菌落出现。 空气培养结果： 平皿敞开在实验室的窗台上放置，当时阳光照在上面： 平皿出现了五种菌落： （1）11个；中等大小；白色、光滑、湿润、半透明、圆形 （2）2个；较大；周围白色，中间有一个透明圈，光滑、湿润、中间凹的圆饼状 （3）1个；较大；周围黄色，中间有一个透明的圆形区域，半湿润、没有光泽 （4）1个；较大；边缘橘黄色，中央偏白、明显凸起、干燥、形状不规则 （5）1个；较大；边缘透明，中央乳黄色，光滑、湿润、半透明、圆形 取其中（3）、（4）进行革兰氏染色，结果如下： （3）G-，杆菌。和手指消毒前的细菌一样 （4）出现三种细菌：G-，双球菌 G+，双球菌 G-，梭菌 霉菌形态及菌落特征的观察实验五 霉菌形态及菌落特征的观察 一、目的要求 1.掌握观察霉菌形态的基本方法，并观察其形态特征。 2.掌握常用的霉菌制片方法 二、基本原理 霉菌菌丝较粗大，细胞易收缩变形，而且孢子很容易飞散，所以制标本时常用乳酸石炭酸棉蓝染色液。此染色液制成的霉菌标本片其特点是：(a)细胞不变形；(b)具有杀菌防腐作用，且不易干燥，能保持较长时间；(c)溶液本身呈蓝色，有一定染色效果。 霉菌自然生长状态下的形态，常用载玻片观察，此法是接种霉菌孢子于载玻片上的适宜培养基上，培养后用显微镜观察。此外，为了得到清晰、完整、保持自然状态的霉菌形态还可利用玻璃纸透析培养法进行观察。此法是利用玻璃纸的半透膜特性及透光性，将霉菌生长在覆盖于琼脂培养基表面的玻璃纸上，然后将长菌的玻璃纸剪取一小片，贴放在载玻片上用显微镜观察。 三、器材 曲霉（Aspergillussp．），青霉（Penicillium sp．），根霉（Rhizopus sp．），毛霉（Mucor sp．）； 乳酸石炭酸棉蓝染色液，20％甘油，查氏培养基平板，马铃薯培养基；无菌吸管，载玻片，盖玻片，U形棒，解剖刀，玻璃纸，滤纸等。 四、操作步骤 1．一般观察法 于洁净载玻片上，滴一滴乳酸石炭酸棉蓝染色液，用解剖针从霉菌菌落的边缘处取小量带有孢子的菌丝置染色液中，再细心地将菌丝挑散开，然后小心地盖上盖玻片，注意不要产生气泡。置显微镜下先用低倍镜观察，必要时再换高倍镜。 2．载玻片观察法 (1)将略小于培养皿底内径的滤纸放入皿内，再放上U形玻棒，其上放一洁净的载玻片，然后将二个盖玻片分别斜立在载玻片的两端，盖上皿盖，把数套（根据需要而定）如此装置的培养皿叠起，包扎好，用1．05kg/cm2，121．3℃灭菌20分钟或干热灭菌，备用。 (2)将6—7ml灭菌的马铃薯葡萄糖培养基倒入直径为9cm的灭菌平皿中，待凝固后，用无菌解剖刀切成0．5—1cm的琼脂块，用刀尖铲起琼脂块放在已灭菌的培养皿内的载玻片上，每片上放置2块。 (3)用灭菌的尖细接种针或装有柄的缝衣针，取（肉眼方能看见的）一点霉菌孢子，轻轻点在琼脂块的边缘上，用无菌镊子夹着立在载玻片旁的盖玻片盖在琼脂块上，再盖上皿盖。 2 (4)在培养皿的滤纸上，加无菌的20％甘油数毫升，至滤纸湿润即可停加。将培养皿置28℃培养一定时间后，取出载玻片置显微镜下观察。 3．玻璃纸透析培养观察法 (1)向霉菌斜面试管中加入5ml无菌水，洗下孢子，制成孢子悬液。 (2)用无菌镊子将已灭菌的、直径与培养皿相同的圆形玻璃纸覆盖于查氏培养基平板上。 (3)用1ml无菌吸管吸取0．2ml孢子悬液于上述玻璃纸平板上，并用无菌玻璃刮棒涂抹均匀。 (4)置28℃温室培养48小时后，取出培养皿，打开皿盖，用镊子将玻璃纸与培养基分开，再用剪刀剪取一小片玻璃纸置载玻片上，用显微镜观察。 五、实验报告 1．结果 绘图说明你所观察到的霉菌形态特征。 2．思考题 (1)比较细菌、放线菌、酵母菌和霉菌形态上的异同。 (2)玻璃纸应怎样进行灭菌？为什么？ 常见食用菌菌种的特征作者：王占松 瓜果蔬菜报 2005年04期 　　一、正常母种的特征：　　1、生长整齐、有力、边缘圆滑、丰满。　　2、色泽一致、均匀，正常分泌色素。　　3、生长态势良好，速度正常。　　4、菌丝旺盛、健壮、无拮抗。　　二、