油菜籽蛋白水解物中的抗氧化活性和持水能力.doc

油菜籽抗氧化活性和持水能力菜籽为五大油料作物，因此是非常重要的农业产业。加拿大油菜，北美国农业的主要资源低硫苷和芥酸，因此也被称为“双重零”。其种子和油远销世界许多地区，包括美国，墨西哥，日本，中国和欧洲。全球需求主要的。然而，一旦油从种子，富含蛋白质的食物。考虑到大量产生的副产品提取过程，这将大大有利于农业产业发展技术使用这种蛋白质来源发展增值产品。努力在实践中可能会受到许多因素，如存在的磷和硫苷，以及商业变性蛋白质提取工艺降低其溶解度这些因素使油菜/油菜籽蛋白人类的食物的方式因此，目前使用的菜籽粕一般只限于动物饲料和肥料。许多调查都集中在利用油菜籽蛋白生产有价值。一些研究已经集中在消除不良成分，这一进程证明是复杂的因此，一个方法修改蛋白质食物物理和化学特性的而不改变其总氨基酸组成进一步调查表明，简单的水解，通过化学或酶的手段，是一个潜在的解决溶解度这种产品更易溶于水，原来的蛋白质的氨基酸组成基本保持不变。大量的研究已进行了对从不同的蛋白质来源水解制备，为了更好地了解他们的性能这些包括多春鱼蛋白水解物蛋白水解物酪蛋白水解蛋白乳清蛋白水解物和葵花籽蛋白水解物般结果往往表明，水解蛋白质溶解度不同程度取决于蛋白组成和水解度。例如，shahidi等人报道，毛鳞鱼蛋白，在一定的水平0.5–3%，在煮熟的猪肉模型系统抑制形成17.7–60.4%之间。类似的效果马铃薯蛋白水解物肉蛋白水解液被发现在提高肉制品持水能力水解更好地利用的菜籽粕研究已经进行了评估水解产物。vioque等人调查菜籽水解蛋白在这项研究，抗氧化活性的油菜籽蛋白水解制备采用2种不同的蛋白酶在肉类模型系统蓄水量受每水解影响。 用于本研究加拿大西部和从利马格兰加拿大种子公司种子，采样和存储在18°C直到使用碱性蛋白酶和风味蛋白酶购诺维信，巴格斯瓦德，丹麦。所有的化学品取自尔科技有限公司西格玛–奥德里奇加拿大制备菜籽蛋白水解物整个油菜种子进正己烷脱脂正己烷提取方法曾先生等人描述。脱脂菜籽粕样品进行真空包装和储存在20摄氏粗蛋白含量的用凯氏定氮法测定分析根据标准方法在计算样本量所需的水解过程，基于酶/蛋白比。vioque等人选定的条件下水解1在50PH值为8的碱性蛋白酶水解1小时样品2在50PH值为风味使用两者的结合酶水解，即第一碱性蛋白酶为1小时，其次是风味的2小时条件是不断监测和维护整个过程 2.3DPPH自由基清除测定 DPPH自由基清除油菜籽蛋白的酶法制备活性水解被确定后，根据Shahidi，Liyana Pathirana和华尔街（2006）稍作修改描述。一系列浓度的冻干水解样品在一系列的浓度在95％乙醇溶解（1.25，2.5，5和10毫克/毫升）。一个等份（0.1毫升）样品溶解液混合于DPPH- 乙醇1.9毫升，此溶液容许放置于室温下30分钟。使用吸光度在517nm的分光光度计，计算蛋白水解物对自由基的清除能力如下公式：=100× ［Abs control -（Abssample - AbsblankT）］=Abscontrol Abs control 是除了被蛋白水解物吸收自由基被吸收的量，而Absblank代表没有清除自由基的蛋白水解物因蛋白质在此吸收波长。 2.4降低功耗的测定 降低功耗的油菜籽蛋白水解物按照Duh, Yen, Yen and Chang。简言之，油菜籽蛋白质水解样品分别溶解在浓度为1.25，2，5，10毫克/毫升0.2 M磷酸缓冲液（pH值6.6）中。取样品溶液（2.5毫升），然后添加到2.5毫升10毫克/毫升的铁氰化钾溶液并在50 摄氏度下孵育 20分钟。孵育后，加入去离子水（2.5毫升）和氯化铁溶液（1.0毫克/毫升，0.5毫升）然后立即在吸光度为700毫微米下记录数据。三氯乙酸的步骤被省略，因为它会沉淀出蛋白质，其抗氧化活性不明确。同时还要做只包含水解样品的对照和空白实验，因为蛋白质在此的波长下会被吸收。 2.5持水能力的测定 在肉类模型系中油菜籽蛋白质水解能力由Shahidi，Synowiecki定义。彻底混合猪肉8.5克和1.5克蒸馏水，加入0.5和1％（W / W）水平为油菜籽蛋白水解物。同时需要做空白与对照试验。混合物能在冷室中置放1小时，并随后在95℃下烧灼1 h最后用自来水冷却。用滤纸除去滴水，记录肉的重量。滴水量通过烧灼后的体积流失来。保水能力为不同的蛋白质水解有人滴灌量减少针对控制。不同蛋白水解物的持水能力变现为滴水量减少的控制。 结果与讨论 按重量计算，脱脂菜籽粕的蛋白质含量为34.5％，基于金额的基础上继续消耗，在水解过程中pH值不变，样本由碱性蛋白酶水解，水解组合碱性碱性蛋白酶和风味蛋白酶有类似水解（分别是20.6％和18.9％），而水解与风味准备单独的最低水解度（6.33％）。碱性蛋白酶与风味蛋白酶能产生比单独使