第十六章 DNA生物合成090608.ppt

第十六章 DNA的生物合成——复制 DNA聚合酶功能 5′?3′聚合作用 5′?3′外切酶活性：切除引物，切除突变片段 3′?5′外切酶活性：校 读 二、DNA连接酶(DNA ligase)P373 Topo酶：切割DNA链，使其松弛后再连接 一、复制的起始 亲代DNA开链，复制起始点呈叉型移动 三 复制的终止 1.原核生物复制终止 2.真核生物复制终止 复制过程中各酶和蛋白质因子的作用 第八节 DNA的反转录合成P395 损伤修复 1. 光修复 紫外光照射可使相邻的两个T 形成二聚体 光修复酶可使二聚体解聚为单体状态，DNA完全恢复正常。光修复酶的激活需300-600μm波长的光。 2. 切除修复 参与的酶有 核酸内切酶，polⅠ,DNA连接酶 重DNA 普通DNA 中等密度DNA 全保留 混 合 一代 二代 一代 二代 1.半不连续性：DNA复制过程中，一条链是连续复制，另一条链是不连续复制的现象 第四节 DNA半不连续复制P377 4. 冈崎片段（Okazaki fragment）： 不连续复制的片段 3. 随从链: 链的延长方向(5’?3’)与解链方向相反，为不连续复制 2.领头链:链的延长方向(5’? 3’)与解链方向 相同, 为连续复制 第五节 DNA复制过程P378 1.复制的起始 2.链的延长 3.复制的终止 DNA复制过程: 复制叉 亲代DNA 分子 3’ 5’ 3’ 5’ 复制起始点（ori）：DNA复制要从DNA分子的特定部位开始，此部位称复制起始点 ????原核：一个起始点，约245bp,特殊的重复序列 ????真核：多个起始点 ori 双向复制 ori ori 复制子 ori ori 真核生物两个相邻复制起始点之间的DNA片段 以起始点为中心，向两个方向进行复制 一 复制的起始 (一) DNA解成单链 由特定蛋白质识别复制起始位点（ori），在解螺旋酶、TOPO酶及单链DNA结合蛋白的共同作用下，DNA解链，解旋，形成复制叉 ? 倒Y (二)引发体的生成 解旋酶解开双链后引物酶进入形成引发体 5′ 3′ 3′ 5′ 引物酶 DnaC 引发体 解旋酶 （三） RNA引物的合成 5′ 5′ RNA引物 5′ 3′ 5′ 3′ 引物合成后，由DNA polⅢ（在真核细胞为DNA聚合酶?和?)催化，按碱基配对原则，将dNTP逐一添加到引物3’ 末端，形成磷酸二酯键，使新合成的链不断延长 二 复制的延长 3’——AAGACCTATT——5’ 5’——TTCTGGATAA——3’ DNA Pol I, II and III 5’- DNA - OH 5’- DNA - O - P -N - OH P P + + dNTPs 冈崎片段引物的消除和连接 RNA引物 RNA酶 DNA pol I DNA连接酶 第七节 DNA重组  基因重组: 由于不同DNA链的断裂和连接而产生DNA片段的交换和重新组合，形成新DNA分子的过程。 DNA重组 同源重组 :发生在同源序列间的重组称为同源重组 特异位点重组:是由整合酶催化，在两个DNA序列的特异位点间发生的整合。 转 座重组 :由插入序列和转座子介导的基因移位或重排称为转座 内切酶 (recBCD) DNA侵扰 (recA) 分支迁移 (recA) 内切酶 (recBCD) DNA 连接酶 5′ 3′ 5′ 3′ 5′ 3′ 5′ 3′ 5′ 3′ 5′ 3′ 5′ 3′ 5′ 3′ 5′ 3′ 5′ 3′ 5′ 3′ 5′ 3′ 5′ 3′ 5′ 3′ 3′ 3′ 5′ 3′ 5′ 3′ 3′ 5′ 5′ 3′ 5′ 3′ 5′ 3′ Holiday中间体 5′ 3′ 5′ 3′ 5′ 3′ 5′ 3′ 目 录 Holiday中间体 5′ 3′ 5′ 3′ 5′ 3′ 5′ 3′ 5′ 3′ 5′ 5′ 5′ 3′ 3′ 3′ 5′ 5′ 5′ 5′ 3′ 3′ 3′ 3′ 5′ 5′ 5′ 5′ 3′ 3′ 3′ 3′ 5′ 5′ 5′ 5′ 3′ 3′ 3′ 3′ 5′ 5′ 5′ 5′ 3′ 3′ 3′ 3′ 内切酶 (ruvC) 内切酶 (ruvC) DNA 连接酶 DNA 连接酶 片段重组体 拼接重组体 目 录 反转录合成：以RNA为模板,按RNA中的碱基顺序进行碱基配对合成DNA的过程. 逆转录酶:又称为反转录酶，是依赖RNA的DNA聚合酶 逆转录酶是多功能酶，有三种酶活性： 1. 逆转录活性：即以RNA为模板合成DNA 2. RNase活性：水解RNA:DNA中的RNA 3. DNA pol活性：以DNA为模板合