沉积物浸出液；中华大蟾蜍；非洲爪蟾；蝌蚪.doc

北京城区沉积物对蟾蜍蝌蚪影响马　越　高家思 指导教师北京师范大学 刘新会 教授彭安　高级实验师北京师范大学第二附属中学 张慧第30届北京青少年科技创新大赛摘要 为北京地区对中华大蟾蜍及非洲爪蟾的影响，取昆明湖、积水潭太平湖和什刹海前海水域共9个采样点的沉积物和表层水制备沉积物浸液曝气3后的自来水，培养中华大蟾蜍和非洲爪蟾的受精卵72h出膜率和不同培养时间的成活率，并测定不同时期蝌蚪的超氧化物歧化酶的同时测定沉积物浸液的重金属含量结果分析表明： 关键词 沉积物浸液；中华大蟾蜍；非洲爪蟾；出膜率；成活率；SOD1.1 选题的产生 环境污染就是指人类直接或间接地向环境排放超过其自净能力的物质或能量，从而使环境的质量大幅降低的现象，它对人类的生存与发展和生态系统的和谐造成一定的负面影响。随着经济的快速增长以及城市化进程的不断扩大，环境污染日趋严重。由于我国污水处理能力不足，大量的工业废水、生活污水等排入自然水体。随着时间延长，污染物在沉积物中逐渐积累，威胁着水生生物的健康。同时，当环境受到扰动时，污染物容易沉积物中释放出来，从而形成“二次”污染。因此，沉积物-水环境构成的环境体系因其复杂、动态污染的特点成为研究热点]。 生态环境是一个极其复杂的体系，生物与环境相互作用的统一整体，环境中的各种理、化条件的改变直接影响到生活在该环境中的生物，从而影响到生物体的内部功能和种间关系，以至影响生态；同时，生物不断地影响、改变着环境，二者相互依存、协同进化。本题中华大蟾蜍和非洲爪蟾，两种蟾蜍在沉积物浸出液中的72h出膜率和不同培养时间的成活率，并测定不同时期蝌蚪的超氧化物歧化酶的，分析沉积物对的影响，从而1.2 研究设想和解决的问题 在实验中，拟观测蝌蚪出膜率成活率，超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase)活性其中，超氧化物歧化酶对机体的氧化与抗氧化平衡起着至关重要的作用，此酶能清除超氧阴离子自由基（O2-）从而保护细胞免受损伤，当机体受到重金属等污染时，会导致生物体体内的SOD活性一般会发生显著变化，据此通过与正常生物体的比较就可以得知污染对生物体影响的程度[]。将与研究区域理化检测结果进行相关性分析，了解北京城区水环境现状，资源。2 研究主要通过采样地点，取沉积物及对应的表层水体沉积物浸液进行生物实验，分析结果得出结论 图1 技术路线流程图 确定采样地点：经过文献及，根据采样原则，粗略的确定北京城区主要自然及人工水体作为研究区域。然后，进行实地环境考察，根据研究区域的周围环境进行可行性分析，最终确定的沉积物及对应的表层水的采样地点。两种环境检测结果的相关性分析：分别对环境样品进行选定污染物—重金属含量的检测与生物检测，对照两种检测方法的结果，3.1 实验动物 采用性成熟的中华大蟾蜍（4对）及非洲爪蟾（2对）作为实验动物，见表1。表1实验动物来源及状态表 平均体重（g） 数量（只） 性别 动物来源 中华大蟾蜍 126.37 4 ♀ 河北地区 中华大蟾蜍 220.76 4 ♂ 河北地区 非洲爪蟾 89.68 2 ♀ 中国科学院遗传与 发育研究所 非洲爪蟾 127.51 2 ♂ 中国科学院遗传与 发育研究所 3.2 实验仪器、试剂 仪器：多功能酶标仪、恒温水浴锅、冷冻离心机、电感耦合等离子光谱仪、旋涡混匀器、电子天平、微量式移液器、抓斗取泥器、2000ml取水器等。 试剂：注射用绒毛膜促性腺激素（hCG,丽珠医药）、考马斯亮兰蛋白测定试剂盒南京建成生物科技有限公司超氧化物岐化酶测试盒（南京建成生物科技有限公司）、冰醋酸、生理盐水等。 3.3 经过文献及地理资料查阅结合实地环境考察，依次选取什刹海前海、积水潭太平湖、颐和园昆明湖作为研究区域并分别在这三个区域内各取三个不同的地点作为采样点]，见图。 图 所研究的不同水域在北京城区的分布图 注： 图 3个研究水域的9个采样点示意图 注： 1-1 积水潭桥西500m 1-2 积水潭桥西100m 1-3 积水潭桥东100m 2-1 前海严禁过桥处 2- 前海金锭桥2-3 前海中央3-1 颐和园苏州街 3-2 颐和园十七孔 3-3 颐和园昆明湖中央采用取水器和抓斗式采泥器，分别采集表层水样及沉积物样品。称取沉积物200g于塑料桶内，加入2000ml对应地点的水样，用玻璃棒将沉积物充分搅拌至悬浮状态，静置h，得到沉积物浸液[]。 3.4实验3.4.1性成熟蟾蜍的实验室促排卵过程 将性成熟的中华大蟾蜍（4对）和非洲爪蟾（2对）分别饲养在半透明的大水族箱中，养殖用水为曝气3后的自来水，并用碎石子在水中堆起成岛屿，为蟾蜍提供水、陆两种生活环境。 对雌雄蟾蜍分别腹腔注射700IU和800IU人绒毛膜促性腺激素（hCG）。24h～48h后，雌蟾蜍排卵，记录排卵时间，观察其在水中