分子肿瘤学(四川大学国家重点实验室)培训课件方案研究.ppt

是一类正常的基因, 这类基因作为细胞的刹车而起作用。它们编码的蛋白能够抑制细胞的生长，阻止细胞恶性转变。 如果其功能失活或出现基因缺失、突变等异常，将导致细胞无限制地生长和分裂, 形成肿瘤。 如果其功能失活或出现基因缺失、突变等异常， 将导致细胞无限制地生长和分裂, 形成肿瘤。 抑癌基因在理论上需符合的三个基本条件 在恶性肿瘤的相应正常组织中该基因必须正常表达 在恶性肿瘤中这种基因应有功能或结构改变或表达缺陷 将这种基因的野生型导入基因异常的肿瘤细胞内,可部分或全部改变其恶性表型 抑癌基因的功能 调节细胞生长﹑增殖 诱导细胞分化 诱导细胞凋亡 调节血管生成 维持其他基因的功能 抑癌基因与癌基因的差别 在细胞水平抑癌基因表现为隐性，原癌基因是显性的 在功能上抑癌基因对细胞生长起负调节作用，癌基因则相反 抑癌基因的隐性突变不影响遗传物质的正常传递,带 有单一等位基因突变的抑癌基因能够被传给下一代, 使这些个体具有相应疾病的易感性. 抑癌基因的研究历史 1960年在研究儿童视网膜母细胞瘤的基因突变时,发现了抑癌基因的功能 1986年Weiberg等克隆出了与视网膜母细胞瘤有关的抑癌基因Rb 目前已克隆的抑癌基因和未被克隆的候选抑癌基因已超过40余种 Rb 基因 视网膜细胞癌基因 (retinoblastmoma gene, Rb)是第一个被克隆的抑癌基因，发现于儿童的视网膜母细胞瘤 . 1986年美国的三个实验室分别独立克隆了该基因 在肺癌﹑骨肉瘤和乳腺癌中也发现有Rb基因的缺失和失活（小细胞肺癌中异常为50%﹑骨肉瘤47%﹑乳腺癌32%) Rb 基因缺失 Rb基因比较大，全长约200kb, 编码核内磷酸化蛋白（pRb蛋白），定位于核内 有磷酸化和非磷酸化两种形式，非磷酸化形式称活性型，能抑制细胞增殖 pRb的肿瘤抑制作用是通过其对细胞增殖,分化和细胞凋亡的调节来进行的 Rb 基因和细胞周期调控 Rb的磷酸化状态为Rb 基因调节细胞生长分化的主要形式 2. 调节Rb功能最为重要的磷酸化事件在G1和S期交界处 3. 磷酸化可以使Rb与细胞内蛋白形成复合物的能力丧失 4. 在G1期，Rb 为去磷酸化的状态，当细胞开始进入S期，磷酸化状态急剧 Rb基因的磷酸化 Rb 基因调控细胞周期的机制 Rb基因异常与肿瘤 基因的异常主要表现为等位基因缺失和基因突变 在视网膜细胞瘤﹑小细胞肺癌﹑非小细胞肺癌﹑膀胱癌﹑乳腺癌﹑软组织肉瘤﹑肝癌等肿瘤中发现有高频率的等位基因丢失和基因突变 在肿瘤的发生中，Rb 基因与p53﹑ C-myc﹑ C-fos﹑TGF等还存在相互调节的关系 Rb 与其他相关基因间的调节机制尚需进一步阐明 是tumor suppressor gene 一明珠，Pubmed有超过3万篇论文， 1979年， 发现SV40转化的细胞中与SV40-large T抗原结合， 而被误认为癌基因，直到1989年才被证实为抑癌基因 DeLeo AB, Jay G, Appella E, Dubois GC, Law LW, Old LJ. Detection of a transformation-related antigen in chemically induced sarcomas and other transformed cells of the mouse.Proc Natl Acad Sci U S A. 1979 May;76(5):2420-4.  Baker SJ, Markowitz S, Fearon ER, Willson JK, Vogelstein B. Suppression of human colorectal carcinoma cell growth by wild-type p53. Science. 1990 Aug 24;249(4971):912-5. p53和肿瘤 p53基因异常与肿瘤 p53 基因的缺失或突变已被证实是人类肿瘤中p53功能丧失的主要原因，突变形式可表现为点突变﹑缺失突变﹑ 插入突变﹑ 移码突变 目前已知的突变位点约有3500种，多集中于第5-8外显子 p53基因甲基化状态的变化也是较为常见的基因异常 在胃癌﹑结直肠癌﹑膀胱癌﹑乳腺癌﹑头颈部鳞状细胞癌﹑肺癌﹑前列腺癌﹑肝癌﹑软组织肉瘤﹑淋巴造血系统肿瘤等都发现有p53 的点突变 在乳腺癌﹑肺癌﹑骨肉瘤﹑结肠癌中发现有 p53的基因缺失异常 p53基因的结构 p53基因全长20kb，定位于人类染色体17p13.1，由11个外显子组成 编码393个氨基酸组成的