嗜酸乳杆菌教学教材.pptx

嗜酸乳杆菌嗜酸乳杆菌是目前乳酸菌家族中极为重视研究与开发的益生菌(probioties）之一，被视为第三代酸乳发酵剂菌种，是人体肠道中的重要微生物。什么是益生菌？指应用于动物及人体内,通过改善宿主体内的微生态平衡进而促进宿主健康的单一或混合的活的微生物制剂。益生菌的生理功能调整肠道菌群平衡,抑制腹泻促进乳糖的消化吸收,缓解乳糖不忍耐症增加乳中可消化性的蛋白质、维生素的含量降低血清胆固醉水平抑制癌症的形成和发展刺激免疫系统,提高免疫功能消除便秘抑制妇女阴道炎症嗜酸乳杆菌（ Lactobacillus acidophilus）属于乳杆菌属(Lactobacillus) ，革兰氏阳性杆菌，杆的末端呈圆形，主要存在小肠中，释放乳酸，乙酸和一些对有害菌起作用的抗菌素，但是益菌作用比较弱。嗜酸乳杆菌不产芽抱，无鞭毛，不运动，同型发酵乳糖，不液化明胶，接触酶阴性，最适生长温度为35℃～38℃，最适pH值为5.5－6.4，G＋C含量为36.%－37.4%，是一类厌氧或兼性厌氧的微生物。嗜酸乳杆菌是栖息在人体肠道内的有益菌之一，当存在一定数量时，它能有利地调节肠道内有益和有害微生物菌群间的平衡，从而达到促进宿主健康的功效。嗜酸乳杆菌嗜酸乳杆菌不仅在胃中，它还是人体小肠内的主要益生菌。 在胃中能存活的致病菌的胃部是个小型消毒车间，这是由于胃液具有很强的酸性。嗜酸乳杆菌的生理功能生物屏障作用 嗜酸乳杆菌于肠粘膜上皮细胞相互作用、密切结合构成了生物学屏障；同时，通过其自身及其代谢物与其它细菌之间的相互作用，调整菌群之间的关系，维持和保证菌群最佳优势组合以及这种组合的稳定，阻止了致病菌的定殖和入侵，拮抗致病菌和有害微生物的生长及其毒素的粘附。营养作用 乳酸菌发酵后产生的乳酸，可提高胃内食物的预消化，提高钙、磷、铁的利用率和维生素D 的吸收；乳糖分解产生的半乳糖，是构成脑神经系统中脑苷脂的成分，与婴幼儿出生后的生长有密切的关系；同时产生的大量维生素B 群能促进人体神经细胞的发育；提高人体肠内的β－半乳糖苷酶的活性，促进奶质中乳糖的吸收，从而缓解乳糖不耐症；能分泌蛋白酶，促进蛋白质的消化吸收。抗癌作用 腐败性细菌作用于食物成分和胆汁酸盐类，能生成亚硝基化合物、胆固醇及胆汁酸的代谢物、氨基酸代谢物（酚类、吲哚、硫化氢）等有机致癌物质。与这些致癌物质有关的肠内细菌酶有β-葡萄糖醛酸酶、巯基还原酶、偶氮还原酶等。嗜酸乳杆菌能改善肠道菌群，抑制了致癌物质的产生；同时，嗜酸乳杆菌及其代谢物活化了免疫功能，抑制癌细胞的形成和增殖。增强机体免疫力 嗜酸乳杆菌在肠道内定殖，相当于自然免疫，能激活机体巨噬活性，诱发特异性和非特异性免疫反应，提高抗感染的能力。延缓机体衰老 人的衰老与肠内有害细菌产生的氨、胺、硫化氢、吲哚、酚、粪臭素等有害腐败产物有很大关系。嗜酸乳杆菌代谢产生的乳酸抑制了这些腐败物，使机体衰老的过程变得缓慢。保加利亚人的长寿和长期服用酸奶有关。嗜酸乳杆菌的分离与筛选、鉴定嗜酸乳杆菌的分离与筛选 采集出生 1~7d 的婴儿的新鲜粪便，放入胨液中，进行适当稀释，将稀释的样品与TPY 固体培养基混合后倾注平板，37℃厌氧培养（N2:H2:CO2=8:1:1），进行单菌落分离与纯化。从样品中淘汰球菌及葡萄糖发酵产气（异型乳酸发酵）的菌株，挑选出厌氧生长、菌落圆形、中心较暗、周围显示微毛丝状特征、不产色素的菌株进行鉴定。具有以下特征的菌株可初步鉴定为乳杆菌属：革兰氏阳性、无芽孢、不运动的杆菌，菌体以单个、成双或短链状排列，不分解酪素，不液化明胶, 接触酶试验、氧化酶试验、硝酸盐还原反应、联苯胺反应、吲哚及硫化氢产生等试验均呈阴性。嗜酸乳杆菌的鉴定 对初步鉴定为乳杆菌属的菌株, 再进一步进行形态学及生理生化特征研究。吲哚试验采用TPY 培养基；硝酸盐还原试验采用TPY 培养基+0.1%KNO3；碳水化合物利用试验采用分别含有1%各种不同糖类的TPY 培养基进行。 嗜酸乳杆菌的细胞大小为0.6~0.9′1.5~6.0μｍ(大多数为4μｍ)，两端圆；由精氨酸不产氨；在牛乳中产酸，产ＤＬ-型乳酸，乳酸量为0.55%~0.79%之间，不同程度地凝乳；在15℃不生长，45℃生长。对23种含碳化合物的利用试验结果为：葡萄糖、乳糖、麦芽糖、纤维二糖、水杨苷、果糖、半乳糖、甘露糖、蔗糖、七叶苷均为阳性反应；阿拉伯糖、棉子糖、蜜二糖、葡萄糖酸钠、松三糖、甘露醇、Ｌ-鼠李糖、核糖、山梨醇、淀粉、菊粉、木糖和海藻糖(有些菌种为弱阳性反应除外) 均为阴性反应。符合上述特征者，可鉴定为嗜酸乳杆菌。TPY培养基配方蛋白胨 15.0g 酵母粉 2.0g 葡萄糖 20.0g 可溶性淀粉 0.5g 氯化钠 5.0g 5%半胱氨酸 10.0mL 西红柿浸出液 400.0mL 吐温80 1.0mL（聚山梨酯8