感染性疾病及免疫学检测培训课件方案研究.ppt

常见病毒性传染病及其免疫学检测;传染病：是病原体以某种方式进入到人体后，并在人体内生长繁殖，释放毒素或导致机体内微生态平衡失调，给人体的组织和器官造成一定的损伤而引起的疾病。 ;病原体;免疫学检验主要用于：;常用的免疫学检测方法;酶联免疫吸附试验ELISA （enzyme linked immunosorbent assay） 是一类常用的免疫酶技术。是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面，使抗原抗体反应在固相表面进行。 常用的酶：辣根过氧化物酶(HRP) 碱性磷酸酶（AP）。;基本步骤;金标法;凝集反应;化学发光免疫分析chemiluminescence immunoassay（ CLIA）;CLIA优越性;常见术前检测;病毒性肝炎;甲型病毒性肝炎（HAV）;HAV;HBV (hepatitis B virus）乙型肝炎病毒;我国流行现状;HBV颗粒;HBV特点;;;; 临床组合模式;模式;10;乙肝五项少见模式分析 ;HBsAg和Anti-HBs并存： 在HBV感染恢复期中约有3%的个例可同时检出HBsAg和Anti-HBs,然后HBsAg消失而Anti-HBs水平逐渐升高。在慢性HBV感染者中约3%-5%两者共存，出现Anti-HBs并不表明HBsAg的清除和感染的恢复，可能由于： 1.前后感染两种亚型HBV，或HBsAg与其抗体之间仅有低亲和性反应； 2.S基因变异，其编码的HBsAg抗原性改变，原型Anti-HBs不能将其清除； 3.α 干扰素治疗中出现Anti-HBs血清转换，也因S基因的变异，而未能清除HBsAg。 4.HBV疫苗接种者中也有少数个例虽有正常的Anti-HBs应答，但仍能感染α决定簇变异的免疫逃逸病毒株，从而出现与HBsAg共存的现象。;HBeAg和Anti-HBe并存： 一般是处于乙肝e抗原和e抗体转换时期，e抗原和e抗体以抗原抗体复合物的状态共存。Anti-HBe试剂检测时，血样中的抗原抗体复合物同样可以结合至包被板上，起到了竞争效果。;呈世界性分布;HCV特点;丙型病毒性肝炎(HCV)临床意义;检测方法;检测方法：;HIV (Human Immunodeficiency Virus)人获得性免疫缺陷病毒;我国历年艾滋病病毒感染者和病人数;HIV的结构特点;CD4 抗原;病毒经黏膜或皮肤破损进入体内 感染黏膜或皮肤层树突状细胞 病毒于24小时内在树突状细胞繁殖 病毒于24-28小时到达局部淋巴结 病毒于5天内出现在外周血液中 每个感染细胞可产生5000个病毒颗粒，每人每天可产1010病毒。;HIV的检测;样品;结果判断;梅 毒 syphilis;三个阶段; 后天性梅毒（获得性）： 95%性交 传播，少数因输血、接吻、医务人员不慎受染等直接接触传播。 先天性梅毒（胎传梅毒）： 梅毒螺旋体可自患病母体的血液经胎盘传给胎儿;非梅毒螺旋体抗原血清试验：是以心磷脂、卵磷脂及胆固醇作为抗原检查血清中的反应素，用于初筛试验及疗效观察。可以分为以下四种试验，原理基本相同： 1、性病研究实验室玻片试验（VDRL) ：由于试剂需现配 现用，故而国内实验室很少采用。但VDRL是唯一可用于神经性梅毒诊断的血清学方法 2、快速血浆反应素环状卡片试验 (RPR)：在特制的纸片 上进行，加入一定量特制的炭粉，可使抗原抗体出现 凝集，用肉眼可观察结果。 3、甲苯胺红试验（TRUST)：在试剂中加入甲苯胺红代替炭粉 颗粒，使结果更易于观察。 4、不加热血清反应素试验（USR) ;RPR;非梅毒螺旋体抗原血清试验的缺陷： 1、特异性：由于在多种疾病，如急性病毒性感染、自身免疫 性疾病、结缔组织病、静脉吸毒者以及怀孕妇女中均可出现反应素，所以此类试验有时会出现假阳性反应. 2、敏感性：非梅毒螺旋体抗原血清试验有时出现弱阳性或阴性结果，而临床上又像二期梅毒，此时应将此血清稀释后做定量试验，如出现阳性结果，则为抗体过量引起的前带现象。1－2％二期梅毒病人可出现此现象而发生梅毒血清假阴性反应。此外，由于感染梅毒后反应素的出现晚于特异性梅毒螺旋体抗体，晚期梅毒反应素又可能转阴，因此这类试验不适于一、三期梅毒，对隐性梅毒和神经梅毒也不敏感。因此此类试验做梅毒初筛时，存在一定数量的漏检. 非梅毒螺旋体抗原血清试验的优点： 1、非梅毒螺旋体抗原血清试验表现为滴度随疗程逐渐下降，故可以作为疗效观察的指标 2、此类方法价格低廉;梅毒螺旋体抗原血清试验：用梅毒螺旋体作为抗原检测血清中的抗螺旋体IgM和/或IgG抗体，其敏感性和特异性均较高。常用的有以下五种方法： 1、荧光梅毒螺旋