- 1、本文档共88页,可阅读全部内容。
- 2、有哪些信誉好的足球投注网站(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
查看更多
第二章 基因工程原理及其在食品工业中的应用知识讲稿.ppt
第二章 基因工程原理及其在食品工业中的应用 ;第一节 基因工程基础 ; 3.基因表达(gene expression)
遗传信息转录和翻译的过程。
(1)转录。在DNA分子上合成出与其核苷酸顺序相对应的RNA的过程。
(2)翻译。在RNA的控制下,根据核苷酸链上每三个核苷酸决定一个氨基酸的三联体密码规则,合成出具有特定氨基酸顺序的蛋白质肽链过程。
(3)逆转录。以RNA为模板,按照RNA中的核苷酸顺序合成DNA的过程。; 4.重组DNA技术(recombinant DNA technique)
利用限制性内切核酸酶、连接酶等酶类将不同的DNA进行体外切割、连接构成新的DNA分子的技术。
5.基因工程(gene engineering)
运用限制性内切核酸酶、连接酶等酶类将不同DNA进行体外切割、连接构成重组DNA,再将重组DNA经生物介导或直接导入等转移方法引入受体细胞进行克隆、表达,从而改变生物遗传性以创造生物新种质,或通过大量扩增为人类提供有用产品等的技术。
6.食品基因工程
利用基因工程的技术和手段,在分子水平上定向重组遗传物质,以改良食品的品质和性状,提高食品的营养价值、贮藏价格性状以及感官性状的技术。;;(二)基因工程的基本操作程序
1.运用合适的方法从生物体中分离或通过化学合成制备目的基因。
2.采用合适的方法将目的基因与合适的载体进行体外连接,构建重组DNA。
3.利用合适的方法将重组DNA导入受体生物细胞以获得转化体。
4.采用合适的方法筛选出重组转化体阳性克隆。
5.运用合适的方法对重组转化体阳性克隆进一步分析以及操作,使目的基因在受体生物细胞中高效表达。 ;(三)基因工程的三大理论和三大技术基础
1.三大理论基础
(1)1940年代Avery等人的肺炎球菌的转化试验证明了生物的遗传物质是DNA。
(2)1950年代Watson和Crick发现了DNA分子的双螺旋结构及DNA半保留复制机理。
(3)1960年代Crick关于遗传中心法则的确立,即生物体中遗传信息是按DNA→RNA→蛋白质方向进行传递。
2.三大技术基础
(1)如何从生物体庞大的双链DNA分子中将所需要的基因片段切割下来(限制性内切核酸酶)。
(2)如何将获得的基因片段进行连接(DNA连???酶)。
(3)如何将切割下来的基因片段进行繁殖扩增(基因载体)。;二、基因工程的工具酶 ; 2.限制性内切核酸酶与DNA甲基化酶
限制性内切核酸酶(restriction endonuclease):简称限制酶,指一类能够识别和切割双链DNA分子内核苷酸序列的内切核酸酶。
DNA甲基化酶(DNA methylase):简称甲基化酶,指一类能够识别DNA特定序列,并在其特定碱基的特定位置上引入甲基而发生修饰作用的酶。; 3.限制性内切核酸酶的类型
(1)Ⅰ型。由三种不同亚基组成;辅助因子为ATP、Mg2+及S-腺苷甲硫氨酸;切割位点距其识别位点至少1 000bp;切割作用随机。Ⅰ型限制酶不宜作为基因工程的工具酶。
(2)Ⅱ型。由两个相同亚基组成;辅助因子仅为Mg2+;识别位点常具旋转对称性;切割位点与其识别位点重叠或在其附近;切割作用特异性强。Ⅱ型限制酶是基因工程理想的工具酶。
(3)Ⅲ型。由两种不同亚基组成;辅助因子为ATP和Mg2+,也受S-腺苷甲硫氨酸激活,但并非必需;切割位点一般在距其识别位点3’端24~26bp处。Ⅲ型限制酶在基因工程中也不常用。 ; 限制性内切核酸酶没有种属特异性,即限制性内切核酸酶识别、切割特定序列的能力同底物DNA的来源无关,它可识别、切割各种来源的DNA。
DNA甲基化酶具有种属特异性,生物体的DNA甲基化酶只修饰保护自己的DNA,而不修饰保护非己的DNA。生物体的限制性内切核酸酶不能降解自身被修饰保护的DNA,而只能降解外源的DNA。 ;表4-1 限制性内切核酸酶的类型及主要特性 ; 4.Ⅱ型限制性内切核酸酶的切割方式
在识别序列双链DNA两条链的对称轴上同时切断磷酸二酯键,形成双链平齐末端。
在识别序列双链DNA两条链的对称轴两侧同时从3’端切断磷酸二酯键,形成3’-羟基端2~5个核苷酸突出单链黏性末端。
在识别序列双链DNA两条链的对称轴两侧同时从5’端切断磷酸二酯键,形成5’-磷酸端2~5个核苷酸突出单链黏性末端。;; 5.影响限制性核酸内切酶活性的主要因素
(1)底物DNA制备物的纯度
蛋白质、十二烷基硫酸钠(SDS)、乙二胺四
您可能关注的文档
最近下载
- 雅马哈s03使用说明书.pdf VIP
- 一种从荧光粉废料中回收高纯度钇铕的制备方法.doc.doc
- 部编版语文二年级上册第六单元教材解读大单元集体备课.pptx VIP
- 压实度(灌砂法)试验检测报告.docx
- 2022年地理高考真题深度剖析之自然灾害1老教材公开课.docx VIP
- 生物法还原高浓度高氯酸盐动力学及反应条件的优化.pdf
- 妇产科常见危急重症早期识别、初步处置原则和转诊时期专家讲座.pptx
- 一种多应力加速寿命试验耦合效应分析及寿命预测方法.pdf VIP
- 医疗器械软件产品相关文档模板汇总(软件描述文档模板、软件网络安全描述模板、软件开发文档等).pdf VIP
- 火电厂工艺办法流程.ppt
文档评论(0)