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动物细胞工程 动物细胞与组织培养 细胞核移植与动物体细胞克隆 细胞融合和单克隆抗体制备 动物细胞生长特性: 细胞贴壁: 悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上, 称为细胞贴壁。 细胞的接触抑制: 当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞就会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的接触抑制。 细胞贴壁过程 动物细胞培养条件: 1、无菌、无毒的环境: (添加一定量的抗生素;定期更换培养液,以便清除代谢产物。) 2、营养物质: (葡萄糖、氨基酸、核酸、无机盐、维生素、动物血清等。) 3、温度和pH: 37摄氏度左右, 7.2-7.4 4、气体环境: O2和CO2(95%空气和5% CO2 ) 动物细胞培养应用 生产有价值的蛋白质制品(病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体); 培养的动物细胞可以用于检测有毒物质,判断某种物质的毒性; 为治疗和预防癌症及其他疾病提供理论依据。 三、动物体细胞核移植技术: 动物体细胞克隆:是指将供体细胞的细胞核与受体去核卵细胞的细胞质进行人工组合,借助于卵细胞的发育能力,经过培养发育成胚胎进而形成个体的技术。 * * 漯河高中丁鹏举 dpj7210@ 动物细胞培养 定义:是指在体外模拟动物体内环境,将动物细胞或组织在无菌、温度适宜和营养充足的条件下培养,使其继续生长、增殖并维持原有结构和功能的技术。 1、取材: 动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织。它们细胞增殖能力强,分裂旺盛,分化程度低,容易培养。 用胰蛋白酶等处理动物组织,形成分散的悬浮细胞。动物细胞培养适宜的pH为7.2—7.4,此环境下胃蛋白酶(2.0)没有活性,而胰蛋白酶(7.2-8.4)的活性较高。 2.分散成单个细胞 3.过程: 原代培养:是指从供体获取组织或细胞后的初次培养。 传代培养:将原代培养的细胞分离稀释后转入新的培养瓶中继续培养,称为传代培养。 思考: 细胞发生接触抑制后如何使细胞继续分裂增殖? 细胞悬浮液 10代细胞 50代细胞 无限传代 原代培养 传代培养 细胞株 细胞系 4.如何界定原代培养和传代培养;细胞株和细胞系? 多数组织细胞粘附在培养瓶表面生长和分裂。 随细胞增多,细胞会出现接触性抑制 遗传物质改变 细胞的全能性 细胞株、细胞系 植物体 培养结果 大量获得细胞或细胞产物 快速繁殖、培育无病毒植株等 培养目的 动物血清 植物激素 培养基特有成分 液体培养基 固体培养基 培养基性质 细胞增殖 原理 动物细胞培养 植物组织培养 比较项目 植物组织培养和动物细胞培养的比较 核移植 胚胎细胞核移植 体细胞核移植(难度高) 克隆羊“多利”的产生过程:
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