重组蛋白质纯化手册2009第三部分.pdf

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通常在细胞密度比较低 (A600=0.5 )时诱导能提高溶解的标签蛋白的产量,但有些情况下在细 胞密度比较高 (1A600单位)时诱导较短时间或仅仅缩短诱导时间比较有利。使细胞密度较高 和不诱导 (比如使用IPTG )或减少诱导试剂的浓度 (如将IPTG的浓度减少至0.1M)能够使产量降 低,但这样能够使更多的标签蛋白表达出完整的形式。 如果改变培养条件不能显著提高可溶性蛋白的产量,则可以使用一些变性剂如4-6M的盐 酸胍、4-8M的尿素、去污剂、碱性pH值 (9)、有机溶剂或N-十二烷基肌氨酸等溶解包涵体。 每种变性剂的溶解作用都受还原剂浓度、作用

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