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SDS-PAGE与Western blotting.doc

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    蛋白抽提与Western blotting [原理]强阳离子去污剂SDS与还原剂并用，并加热使蛋白质解离。变性的多肽与SDS结合而带负电，SDS多肽复合物在PAGE中的迁移率只与多肽的大小相关，到达饱和状态下，每克多肽约可结合1.4g去污剂。 PAGE能有效的分离蛋白质,主要依据其分子量和电荷的差异,而SDS(SDS变性不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳)的分离原理则仅根据蛋白质的分子量的差异,因为SDS的样品处理液是在要跑电泳的样品中假如含有SDS和巯基乙醇(2-ME)或二巯基赤藓醇(DTT),其可以断开半胱氨酸残基之间的二硫键,破坏蛋白质的四级结构,SDS是一种阴离子表面活性剂即去污剂,它可以断开分

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