PEG对胡萝卜花粉离体萌发影响.docVIP

PEG对胡萝卜花粉离体萌发的影响 　　摘 要：研究了不同分子量的PEG（聚乙二醇）对胡萝卜花粉离体萌发的影响。试验结果表明，不同分子量的PEG对花粉离体萌发率的影响不同，PEG-6000较其他2种分子量的PEG促进花粉萌发的效果要好；3种分子量PEG的最适浓度不尽相同，其中 PEG-6000促进胡萝卜花粉萌发的最佳浓度为100 g/L，而PEG-4000和PEG-10000促进胡萝卜花粉萌发的最佳浓度均150 g/L。 　　关键词：PEG；胡萝卜；花粉萌发 　　 聚乙二醇（PEG）是一种高分子渗透剂，能使花粉内膜结构发生变化，改变膜表面的电荷，提高膜的柔软程度和通透性，从而促进花粉萌发和花粉管伸长[1]。周莉花等[2]报道，PEG能明显促进腊梅花粉萌发，一般的离体萌发培养基上花粉萌发率很低，只有向离体萌发培养基中添加PEG，花粉萌发率和花粉管质量才有显著提高。何琪等[3]发现花粉萌发率随着培养基内PEG-4000浓度的增加而增加，当PEG-4000浓度达到15%时，萌发率和净萌发率均达到最高，分别为68.24%和25.96%，当浓度继续上升时，萌发率降低，但降低幅度并不明显。 　　 胡萝卜花粉在一般的培养基上基本不萌发，只有添加了PEG后才能萌发[4]。本试验旨在研究不同分子量及不同浓度的PEG对胡萝卜花粉离体萌发的影响，并进一步确定影响胡萝卜花粉萌发的PEG最适分子量及最适浓度，为进一步开展胡萝卜花粉研究及新品种选育提供理论依据。 　　1 材料与方法 　　1.1 试验材料 　　 山西农业大学园艺学院胡萝卜育种课题组提供的自交系09314花粉。 　　1.2 试验设计 　　 试验设PEG分子量及其浓度2个因子，PEG的分子量有4000、6000和10000三个水平，浓度分别为50，100，150，200，250 g/L，共5个水平。PEG-4000按浓度依次编号为1，2，3，4，5；PEG-6000编号依次为6，7，8，9，10；PEG-10000编号依次为11，12，13，14，15。 　　1.3 试验方法 　　 采集当天开花的胡萝卜花穗的花粉，放于事先铺好硫酸试纸的培养皿内，盖好盖子带回实验室室温保存。 　　 试验所用器具都在100℃条件下消毒20 min，冷却后取出用酒精棉球擦干放在大培养皿中备用。经过消毒的载玻片在使用时要尽量减少与手指接触的面积，以减少污染。 　　 培养基为PEG+BK，PEG按设计分子量和???度组合，BK为0.1 g，均溶解于1 L蒸馏水中。BK的配方：0.1 g KNO3、0.1 g H3BO3、0.3 g Ca（NO3）2?4H2O、0.2 g MgSO4?7H2O。 　　 花粉的萌发与活力检测均在采集当天进行。用滴管吸取液体培养基2~3滴于凹面载玻片上，用消过毒的头发丝蘸取少量花粉，并将其散于培养基表面，注意花粉分布要松散均匀（一般情况下，一个显微镜视野以分布100~200粒花粉为宜）。然后将载玻片放于事先铺好湿润滤纸的培养皿中，并用纱布覆盖后加盖、标记，放于25℃恒温箱内进行暗培养，1 h后在显微镜下观察，选择3个不同视野，3次重复，计算花粉活力。花粉活力（%）=（花粉萌发粒数/总花粉粒数）×100%。 　　2 结果与分析 　　2.1 不同浓度PEG-4000对胡萝卜花粉离体萌发的影响 　　 由表1可知，不同浓度的PEG-4000对胡萝卜花粉萌发有极显著的影响。当PEG-4000浓度为50 g/L时，花粉的萌发率为19.25％，随浓度的增加花粉萌发率也逐渐升高，当PEG-4000浓度升至150 g/L时，花粉萌发率达到最高，为40.59％，但随着PEG-4000浓度的继续增加，花粉萌发率逐渐下降，当PEG-4000浓度为250 g/L时，萌发率仅为25.87％，极显著低于100，150，200 g/L的花粉萌发率，说明高浓度PEG-4000对胡萝卜花粉的萌发具有一定的抑制作用。这表明PEG- 4000浓度过高或过低都不利于胡萝卜花粉萌发，150 g/L是PEG-4000促进胡萝卜花粉萌发的最佳浓度。 　　2.2 不同浓度PEG-6000对胡萝卜花粉离体萌发的影响 　　 在PEG+BK培养基的基础上，改变PEG-6000的浓度，观察胡萝卜花粉萌发情况。表1可知，随着PEG-6000浓度的升高，萌发率增加，PEG-6000达 　　到100 g/L时，萌发率达到最大；再增加PEG-6000的含量，萌发率却呈下降趋势，当PEG-6000浓 　　度为250 g/L时，萌发率仅为33.24％，极显著低于50，100，150 g/L和200 g/L的花粉萌发率，这表明PEG-6000浓度过高或过低都不利于胡萝卜花粉萌发，100 g/L浓度的PEG-6000是促进