遗传性耳聋诊治进展修改版讲解课件.ppt

《线粒体DNA A1555G突变检测试剂盒（PCR-酶切法）》简介 【预期用途】 本试剂盒用于对人血细胞中线粒体DNA A1555G突变的体外定性检测，以指导临床上对氨基糖甙类抗生素的应用，避免药物性耳聋的发生。 【检验原理】 本品采用特异性扩增引物，结合聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）分析方法，检测DNA样本中线粒体基因1555位点的突变情况。 【产品特点】 1.检验操作简单、检验周期短、适合各种普通PCR仪检验 2.灵敏度高、准确性100%、特异性100% 3.价格低 4.目前国内市场上仅此一家生产 【检验方法】主要设备：PCR仪、电泳仪、凝胶成像仪 【结果判定】 1、PCR扩增产物为113bp，正常DNA扩增产物经Hae III酶切后产生111bp和2bp片段；突变个体因存在2个HaeIII酶切位点，酶切后产生91bp、20bp、2bp三个片段。 2、在3%琼脂糖凝胶上，20bp、2bp片段因泳动速率过快，超出观察范围，不可见；而91bp与111bp片段分别在100bp分子量标记的前方和后方，泳动距离有明显差异。 3、若样本PCR产物酶切后见91bp条带，与阳性对照DNA酶切片段泳动距离一致，判断为线粒体DNA 1555位点发生A→G突变，即突变阳性；若PCR产物酶切后见111bp条带，与阴性对照DNA酶切片段泳动距离一致，则判断为1555位点未发生A→G突变，即野生阴性。 4、检验结果说明：无模板对照（NTC）除了引物二聚体不应有任何条带，若出现条带应重复所有实验步骤。Hae III酶切后，阴性对照应见111bp条带，阳性对照应见91bp条带，两条带有明显的泳动距离差异。附（参考照片） Lane M：DL2000: 2000、1000、750、500、250、100bp； Lane－： 阴性对照DNA； Lane＋： 阳性对照DNA； Lane 1-8、10-15、17、19-21：正常DNA样本； Lane 9、16、18： 阳性DNA样本； Lane 22：无模版对照（NTC）； 遗传性耳聋基因和早期听力检测的结合， 将会成为遗传性耳聋早期发现的新途径！ 最终目标 一级预防：开展遗传性耳聋知识的科普宣教 二级预防：耳聋常见基因的孕前筛查和诊断 三级预防：早期发现、早期诊断和早期干预 遗传性耳聋的治疗 目前没有特效的药物治疗,以助听器和电子耳蜗治疗为主! ！避免强噪声，避免头部外伤，禁用庆大霉素、链霉素等耳毒性药物. 听觉脑干植入 中枢听功能研究。 开展中枢听功能试验和探索，重点研究认知与听力的相关性，结合功能成像技术，探讨事件相关电位、声源定位等方法、意义和应用，开发我国原创性技术及其推广. 听力学教育 我国的听力学教育起源于十年前。虽然我国已有开展临床听力学教育的大学，但目前听力学领域从业的数百人仍难以面对我国庞大的听障人群。因此，加强临床听力学领域的专业人才队伍建设，尤其是加快培训听力学工作者，突出显得重要、急迫。听力学人才队伍建设是未来重要的工作内容。 近年来及未来研究的重点包括: 人工假体（包括人工耳蜗，脑干植入等）和诊断装置的开发. 耳发生的细胞及分子基础研究. 内耳干细胞及再生医学. 以细胞为基础的药物开发. 与基因相关疾病的筛查方法。 我们的工作——与国际同道合作共同为聋耳诊治奋斗 * 人体解剖学 * 科研课题《SOUND AND BEYOND训练青少年人工耳蜗术后助听器配置术后音乐音符听辨能力临床研究》 2008.9-2011.950000 我们的工作——积极开展耳聋相关科学研究 * 人体解剖学 * 我们的工作-2000年我科在石市第一例开展人工耳蜗手术 我们的工作——走进平山，消除耳聋 平山县45万人口，听障：8万 平山县听力无障碍计划从2006.3.3爱耳日已开始实施 目 的 1宣传、唤起防聋意识、传播防聋知识、技巧及有效的防聋措施。进行防聋策略的开发，如关注耳毒性药物的预防和噪声性听力损失。 2流行病学分析，通过分析得出听力损失给病人有效的行手术，药物，助听器配置治疗。 3取得省市残联和红十字会支持与赞助。 感想与认识 著名香港大学玛丽医学院耳鼻喉头颈外科主任、教授韦霖提醒我们说内地的患者很多，但直率的讲许多年轻同行的工作做的不够细致，对治疗的患者要加强跟踪随防，认真思考，看我们还有什么不足之处，工作应不断改进和改良，这样就会出很多有义的工作和成果：用心做事，工作要细一点再细一点，舍得花时间，要有团队精神，调动起大家的力量一起努力工作，内地的医生更要接受现代化的观点和学术思想，扎扎实实的做学问…… 这些话值得我们深思。我们的工作还存在着很多粗疏，有人还在犯经验主义，不接受新观念、新技术，坚持走老路子。这些我们需要改正。