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性分化异常42例患者的遗传学分析 中华妇产科杂志 2000年第8期第35卷 论著摘要 作者：赵强　贾婵维　王树玉 单位：赵强（100006 首都医科大学附属北京妇产医院遗传室）；贾婵维（100006 首都医科大学附属北京妇产医院遗传室）；王树玉（100006 首都医科大学附属北京妇产医院遗传室） 　　性分化异常是一类常见的疾病，直接影响患者的身心健康，探讨性分化异常的遗传学病因，有助于临床诊断及治疗。本研究对42 例性分化异常患者的细胞及分子遗传学分析的结果进行讨论，报道如下。 　　一、 资料与方法 　　1. 病例来源：1997年9月至1999年1月在我室做遗传咨询及检查的42例性分化异常的患者。其中，Klinefelter综合征7例，单纯性46，XY性腺发育不全3例（XY女性性反转综合征），先天性肾上腺皮质增生症2例，混合性性腺发育不全1例，单纯性46，XX性腺发育不全22例，Turner综合征7例。临床诊断标准按丘维勤，周焕庚主编的《临床遗传学》［1］。 　　2. 方法：（1）染色体检查：常规制备外周血染色体标本，G显带。每例镜下计数30个分裂相，分析3～5个核型，嵌和体计数100个分裂相，疑有Y染色体的病例行C带检查。（2）SRY基因检查：采用聚合酶链反应（PCR，试剂盒为上海复华公司生产）技术检测Klinefelter综合征、单纯性46，XY性腺发育不全、先天性肾上腺皮质增生症、混合性性腺发育不全、Turner综合征患者体内有无SRY基因。反应体系为30 μl，预变性93℃ 3 min，变性93℃ 5 s，复性55℃ 45 s，延伸72℃ 90 s，循环35 次。后延伸72℃ 5 min。2%的琼酯糖电泳分析扩增产物（446 bp）。以正常男性为阳性对照，正常女性为阴性对照，空白对照做质控。连续扩增3次均阴性者定为阴性，连续两次均阳性者定为阳性。(3)染色体原位杂交检查：对1例用C带检查诊断不清的Turner综合征病例，用Y染色体长臂异染色质特异的探针行染色体原位杂交，以确诊是否携有Y染色体片断。试剂盒由中国协和医科大学基础医学研究所提供，方法按说明书操作。 　　二、结果 　　1.染色体核型及SRY基因扩增检查结果：42例性分化异常患者的染色体核型分析结果见表1。 　　2.染色体原位杂交检查结果：1例Turner综合征用G带及C带不能明确诊断，C带提示“Y”长臂远端深染不明显，用原位杂交复检，最后诊断为46，X，+F。 　　三、讨论 　　1. XY女性性反转综合征： 此类患者具有男性染色体核型，但表型为女性。患者性腺呈条索状，睾丸不发育，具有女性内外生殖器，但外阴发育不良，第二性征差。发育不良的性腺恶变率较高（20%）。我们查出XY性反转综合征3例，用PCR方法扩增SRY基因，与正常男性相同，而正常女性为阴性。结果与国内外学者的研究相同［2，3］。但是，我们扩增的片段为446 bp，不能代表整个SRY基因，亦未能做SRY基因突变分析。3例患者中，2例在我院手术切除性腺，病理检查发现1例为中分化性腺母细胞瘤，定期随访，未发现有肿瘤复发和转移。另1例在外地手术，性腺尚未恶变。 表1　42例性分化异常患者的临床诊断与染色体核型 临床诊断　　核型　例数SRY基因Klinefelter综合征47，XXY76例(+)， 　　1例(-)单纯性46，XY性腺发育不全46，XY3(+)先天性肾上腺皮质增生症46，XX2(-)混合性性腺发育不全45，X/46，XY1(-)单纯性46，XX性腺发育不全46，XX22未查Turner综合征　7(-)　45，X2(-)　45，X，+F2(-)　46，X，i(Xq)2(-)　45，X/46，XY，t(3；12)(3q12,12p13)1(-)　　2. Turner综合征：由于细胞遗传学技术的不断改善以及分子生物技术特别是PCR技术和原位杂交技术在遗传学上的应用，1992年Held证明45, X型的Turner患者只占20.7%，其余为嵌合体［4］。这7例患者中单体型2例（2/7）,说明过去由于技术的限制，有相当一部分嵌合体型被诊断为单体型，实际为隐匿性嵌合体。在各种类型的嵌合体中，携有Y染色体或Y染色体来源序列的嵌合体受到重视，因为这些患者发育不良的性腺发生性腺母细胞瘤和无性细胞瘤的比率高达10%～20%［5］。携有Y染色体序列的嵌合体的比例大小结果不一，0%～60%［5，6］。我们以SRY基因代表Y染色体序列，检查这7例Turner综合征患者是否携有Y染色体序列，结果均为阴性。原因可能是：（1）466 bp片断不能代表整个Y染色体；（2）病例数有限；（3）实验误差造成假阴性；（4）该综合征的嵌合率较低。 　　3.Klinefelter综合征：简称克氏综合征，为男性性腺功能低下中最常见的染色体异常