抗核抗体检测的质量要求及结果的合理判读 李晓军.pptxVIP

抗核抗体检测的质量要求及结果;自身免疫性疾病;自身免疫病(Autoimmune diseases,AID);自身免疫病的系统受累;自身免疫病的“病谱”;自身免疫病共同特征;自身免疫病主要实验检查;自身抗体与临床疾病的关系;自身抗体的特性;常检测的自身抗体;抗核抗体（ANA）; 抗核抗体（ANA） 抗DNA抗体（anti-dsDNA，anti-ssDNA ） 抗组蛋白抗体（histones: H1 , H2A , H2B , H3 , H4 , H2A-H2B） 抗ENA（抗: Sm , nRNP , SSA/Ro , SSB/La, rRNP , Scl-70 , Jo-1 , PCNA , .…）;1.;常规临床诊断ANA种类:数十种;如何根据患者病情挑选具有诊断价值的最佳自身抗体组合? 如何选择合理的检测方法，并对结果作出正确的判断? 将为患者得到及时准确的诊断和治疗发挥至关重要的;免疫检验工作者的目的:;保证检测结果的可靠性和准确性;敏感性（sensitivity） 特异性（specificity）;敏感性和特异性并不能告诉医生阳性结;阳性预测值（PPV） 阴性预测值（NPV）;ANA检测的选择原则;ANA检测的选择原则;ANA免疫学测定方法; IFA－ANA IFA－筛查ANA有效的“金标准”;1);Mariz.Arth Rheumatol, 2011, 63: 191;抗核膜抗体(抗板层素抗体); 粗颗粒型 抗RNP/Sm抗体 荧光模式: § Hep-2细胞:间期时,整个细胞核呈现粗颗粒,但有 时也出现中等到细的颗粒荧光,核仁为阴性;在分裂 期细胞中,浓缩的染色体部位为阴性,而外周区几乎 为均质型、光滑的荧光. §灵长类肝组织切片:细胞核亦呈现颗粒型荧光,核 仁为阴性,荧光强度与 Hep-2细胞相同. 细颗粒型 抗SS-A/SS-B抗体 荧光模式: § Hep-2细胞:间期细胞核呈现细颗粒型荧光,核仁 有部分不发荧光。分裂期细胞在染色体以外显示颗 粒荧光,而染色体本身则不发荧光. § 灵长类肝组织切片: 肝细胞核及部分核仁可见细 颗粒荧光,细胞浆不发荧光. § 在某些细胞（如淋巴细胞、巨噬细胞）中的荧光;ANA常见核型与疾病关系;ANA临床诊断CTD特性;Arth Rheumat,2002, 47, pp 434–444;IFA法检测ANA时应注意的问题;IFA法检测ANA时应注意的问题;IFA法检测ANA时应注意的问题;ANA室间结果很难具备可比性 15个国际Lab同时用HEp-2-IFA进行ANA的检 测，所获得的平均变异系数（CV）值如下：;??分自身抗体的国际参考品;抗ds-DNA检测; 单链DNA,变性的DNA (嘌呤和嘧啶碱基) 双链DNA,天然DNA(氧核糖核酸骨架) 相关疾病: 风湿病: ssDNA: SLE: 80.8%; Sj?gren‘s综合征: 40.0%; 硬皮病: 44.0%; RA: 12.3% (欧蒙) 健康献血员: 6.8% (欧蒙) 风湿病: dsDNA: SLE: 30% - 90%; 欧蒙 (51.7% ) 抗dsDNA抗体 ANA(均质型) 组蛋白抗体： 抗原:组蛋白H1, H2A, H2B, H3, H4(主要的靶抗原为H1 和H2B); 功能: 核小体的形成 相关疾病: 药物诱导性 LE:100% (抗组蛋白抗体是该病 唯一的标志性抗体); SLE:40% - 80%、欧蒙(56.4%); 在 其他风湿病中很少见 抗核小体抗体: 抗原:组蛋白和DNA形成的复合物; 功能:染色体的功能;使用注意事项;使用注意事项;抗可提取性核抗原（ENA）抗体谱的检测;抗ENA抗体检测方法;DID和CIEP;酶联免疫吸附试验(ELISA);免疫印迹技术（IB）;免疫斑点技术（IB）;Jo-1 Centro; 迄今为止还没有一种检测抗ENA既高特异 又高敏感的方法。欧洲Consensus Workshops 曾推荐采用两种或两种以上的方法检测抗ENA 抗体，由于费用昂贵，目前难以广泛采纳。某 些实验室采用ELISA-CIEP联合应用检测技术来 解决ELISA低亲和力的问题，例如，先用简便 快速的ELISA筛查抗ENA抗体，阳性标本再用 CIEP予以确认，但常规实验室也难以接受;ELISA;ANA 检测推荐导则 临床可疑病例