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流式细胞术简介及应用进展讲座
流式细胞术在临床及科研中的应用;1、流式细胞术的基本原理
2、流式细胞术在临床及科研中的应用
3、流式细胞术临床应用的新进展;一、流式细胞术的基本原理;
定义:以流式细胞仪为主要工具,对处在快速直线流动状态中的细胞或生物颗粒细胞的各种成分进行多参数、快速的定量分析和分选的技术。
FCM是诸如生物学、生物技术、计算机科学、流体力学、激光技术、高等数学、临床医学、分子生物学、有机化学和生物物理学等到学科知识综合运用的结晶。
现代流式细胞术,更是由于结合了单克隆抗体技术、定量细胞化学和定量荧光细胞化学的应用,使其在生物学、临床医学、药物学等等众多研究领域的应用有了更加突飞猛进的发展 ;
临床型——小型,科研与临床结合型
科研型——大型,基础研究和加速分选型
; 流式细胞仪——Flow cytomter,FCM
流式细胞术——Flow cytometry,FCM
激发荧光细胞分选仪——Fluorescence activated
cell sorter,FACS(BD公司)
电子程序化单细胞分选仪——Electronically
programmable individual cell sorter,
EPICS (Coulter公司); BD FACSCalibur型 FCM
(单L,3F);Coulter EPICS XL/XL-MCL
(单L,4F);BD FACSVantage SE
(14F, four-way sorting);Coulter EPICS ALTRA
(空/水冷L, 6F);BD LSR
(3L,6F) ;Coulter: FC 500;BD FACSCount;BD FACSCanto 2L 6C;BD FACS Calibur 1L 4C;三、流式细胞术应用的新进展;
高速度:分析细胞数:1000个/s→60000个/s
高灵敏度:荧光分子数/细胞:3000→100个FITC;
高准确度:区分两个细胞:参数:相差5% →1%;
高精度:CV值:7% → 1%;
多参数:荧光:1个 →12个参数;
高纯度:分选细胞:80-90% →99.9%;
其 它:荧光信号:线性检测→对数检测
光谱重叠:补偿修饰剔除联体细胞及碎片;1、 Quantitative FCM (QFCM);2、cytometric bead array (CBA);Principle of CBA :;Thanks for your attention!
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