1、微生物检验与控制 95页.pptVIP

结论 在无菌生产中保证产品安全的唯一方式是通过彻底的培训，遵守严格的纪律，监督和限制人员对关键区域的接触，将风险降到最低 我们必须通过系统性地去除污染风险来建立生产的质量 沉降菌监测 最小培养皿数 沉降菌测试时间 沉降平皿的暴露时间少于4小时； 如果同一位置使用多个沉降平皿进行监测并累计计数，单个沉降平皿的暴露时间可以少于4小时。 表面微生物取样点设置 取样点 设置原则 设备表面 是否与产品接触 墙面 距离地面高度约1.2-1.5m处 地面 房间中央，人员活动较多处 洁净服表面 袖口，肘部，胸前等 环境监测培养基的选择…… 微生物总数 细菌数：在细菌培养基上菌落形成单位的平均数。 真菌数：在真菌培养基上菌落形成单位的平均数。 微生物总数 = 细菌数 + 真菌数 细菌、真菌培养基： 中国药典 欧洲药典 细菌 营养琼脂 30～35℃ 3天 TSA 30～35℃ 5天 霉菌、酵母菌 玫瑰红钠琼脂 23～28℃ 5天 SDA 20～25℃ 5天 酵母菌 酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂 23～28℃ 5天 / GB/T 16293-2010 GB/T 16294-2010 采用大豆酪蛋白琼脂培养基（TSA）配制的培养皿经采样后，在30 ℃ ～35℃ 培养箱中培养，时间不少于2d； 采用沙氏培养基（SDA）配制的培养皿经采样后，在20 ℃ ～25℃ 培养箱中培养，时间不少于5d。 微生物计数的困惑 ！ 细菌培养基上生长的真菌如何计数？ 真菌培养基上生长的细菌如何计数？ 总好氧微生物数（TAMC）： 定义：在TSA（大豆酪蛋白琼脂）培养基上 生长的包括真菌的菌落形成单位总的 数量。 培养温度/时间： 1、细菌： 30～35℃ 5天。 2、细菌： 30～35℃ 2天； 霉菌或酵母菌： 20～25℃ 3天。 酵母菌和霉菌总数（TYMC）： 定义：在SDA（沙氏葡萄糖琼脂）培养基上 生长的包括细菌的菌落形成单位总的 数量。 培养温度/时间： 20～25℃ 5天。 计数原则： 1、TAMC时，如果真菌被发现生长，应该被 作为TAMC计数的一部分。 2、TYMC时，如果细菌被发现生长，应该被 作为TYMC计数的一部分。 3、当TYMC由于细菌的生长而超过了可接受 标准，应当使用含有抗生素的SDA培养基。 培养条件： CHP2010 《中国药典》2010年版 二部 附录XIX Q “药品微生物实验室规范指导原则” 用于环境监测的培养基须特别防护，最好要双层包装和终端灭菌，如果不能采用终端灭菌的培养基，那么在使用前应进行100%的预培养以防止外来的污染物带到环境中以避免出现假阳性的结果。 1117 微生物良好实验室规范 USP 1116 MICROBIOLOGICAL EVALUATION OF CLEAN ROOMS AND OTHER CONTROLLED ENVIRONMENTS 洁净室和其他受控环境的微生物学评估 …media should be examined for sterility and for growth promotion as indicated under Sterility Tests 71 …培养基也应像无菌检测71中标示的那做无菌检 测和促生长检验。 假阳性（False positive） 测试结果实际应该没有微生物生长，但被 判为发现生长或阳性。 产生原因： 1、非无菌培养基平板引人污染； 2、非无菌操作带来污染。 假阴性（False negative） 测试结果实际应该有微生物生长，但被判 为未见生长或阴性。 产生原因： 1、培养基选择不正确； 2、培养基促生长试验失败； 3、培养条件不正确。 GB/T 16293-2010 / GB/T 16293-2010 附录B: B.3 培养基平皿培养及保存 制备好的培养基平皿宜在2～8℃保存，一般以一周为宜或按厂商提供的标准执行。采用适宜的方法在平皿上做好培养基的名称、制备日期剂量的标记。 环境测试培养基： 1、TSA（大豆酪蛋白琼脂） 用于细菌取样。 培养温度/时间：30～35℃ 不少于2天。 2、 SDA（大豆酪蛋白琼脂） 用于霉菌和酵母菌取样。 培养温度/时间：20～2