接种、分离纯化和培养技术讲解课件.ppt

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78、甘氨酸培养基 1)成分 布氏(Brucella)肉汤       1000mL 琼脂             1.6g 甘氨酸(glycine) (又称氨基乙酸aminoacetic acid) 10.0g 2)制法 将以上成分混合,加热溶解,校正pH7.0±0.2,分装13mm×100mm试管,每支约4mL左右,121℃高压灭菌15min,备用。 3)说明 空肠弯曲菌对甘氨酸有耐受性,穿刺接种于甘氨酸培养基中,置于微需氧环境下,在43℃培养48h。在培养基表面出现云雾状现象为阳性,胎儿弯曲菌空肠亚种为阳性结果。 79、改良磷酸盐缓冲液 1)成分 磷酸氢二钠(Na2HPO4)     8.23g 磷酸二氢钠(NaH2PO4·H2O)  1.20g 氯化钠(NaCl)         5.0g 蒸馏水           1000.0mL 山梨醇           10.0g 胆盐            1.5g 2)制法 将磷酸盐及氯化钠溶于蒸馏水中,再加入山梨醇及胆盐,溶解后,校正pH为7.6,分装试管。于121℃高压灭菌15min,备用。 80、氯化镁孔雀绿肉汤 1)成分 1%胰胨水 (高压灭菌)     156mL 1/15mo1/L磷酸氢二钠(Na2HPO4)溶液 (高压灭菌)      40mL 40%(m/V)氯化镁(MgCl2·6H2O)水溶液 (100℃煮沸数分钟)   53mL 0.2%孔雀绿溶液       1.6mL 2)制法 将上述几种溶液按列出的容量混合,即成氯化镁孔雀绿肉汤。分装试管,每管10mL,于4℃可保存10个月。如若配氯化镁孔雀绿羧节青霉素肉汤,除上述几种溶液外,再配制羧节青霉素(carpenicillin)溶液(溶解1mg于1mL水中),将此溶液与其他溶液混合,即成。 81、胰酪胨大豆肉汤 1)成分 胰酪胨(或胰蛋白胨)     17g 植物蛋白胨(或大豆蛋白胨)  3g 氯化钠           100g 磷酸氢二钾         2.5g 葡萄糖           2.5g 蒸馏水           1000mL 2)制法 将上述成分混合,加热并轻轻搅拌并溶解,分装后,121℃高压灭菌15min,最终pH7.3±0.2。 82、Baird-Parker氏培养基 1)成分 胰蛋白胨         10g 牛肉膏          5g 酵母膏          1g 丙酮酸钠         10g 甘氨酸          12g 氯化锂(LiCl·6H2O)    5g 琼脂           20g 蒸馏水          950mL pH7.5 增菌剂的配法:   30%卵黄盐水50mL与除菌过滤的1%亚蹄酸钾溶液10mL混合,保存于冰箱内。 2)制法 将各成分加到蒸馏水中,加热煮沸至完全溶解。冷至25℃,校正pH。分装每瓶95mL,121℃高压灭菌15min。临用时加热溶化琼脂,冷至50℃,每95mL加入预热至50℃的卵黄亚蹄酸钾增菌剂5mL,摇匀后倾注平板。培养基应是致密不透明的。使用前在冰箱储存不得超过48h。 83、7.5%氯化钠肉汤 1)成分 蛋白胨        10g 牛肉膏        3g 氯化钠        75g 蒸馏水        1000mL pH7.4 2)制法 将上述成分加热溶解,校正pH,分装试管,121℃高压灭菌15min。 84、匹克氏肉汤 1)成分 含1%胰蛋白胨的牛心浸液  200mL 1:25000结晶紫盐水溶液  10mL 1:800三氮化钠溶液    10mL 脱纤维兔血(或羊血)     10mL 2)制法 将上述已灭菌的各种成分,用无菌手续依次混合,分装于无菌试管内,每管约2mL,保存于冰箱内备用。 85、3.8%柠檬酸钠溶液 1)成分 2)制法 柠檬酸钠       3.8g 蒸馏水        100mL 取柠檬酸钠3.8g,加蒸馏水到100mL,溶解后过滤,装瓶,121℃高压灭菌15min。   注:兔(人)血浆制备:取3.8%柠檬酸钠溶液一份加兔(或人)全血四份,混好静置之,则血球下降,即可得血浆进行试验。 86、甘露醇卵黄多粘菌素琼脂 1)成分 蛋白胨         10g 牛肉膏         1g 甘露醇        10g 氯化钠         10g 琼脂          15g 蒸馏水         1000mL 0.2%酚红溶液      13mL 50%卵黄液       50m

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