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F+×F- ↓ F+ → F+ F- → F+ 这种F因子的传递与细菌染色体无关。但是F因子偶然地(10000个F+细胞中有一个)能整合到细菌染色体中去,就可能引起染色体的转移 5’ 图 7-13 两个E.Coli 细胞杂交的电子显微镜照片(X 34,300) 性伞毛/接合管 Hfr×F- ↓ Hfr → Hfr F- → F- 接合开始,F因子仅有一部分进入F–细胞,剩下部分基因只有等到细菌染色体全部进入到F–细胞之后才能进入,然而转移过程常常中断 5’ 受体细胞常常只接受部分的供体染色体,这些染色体称为供体外基因子,而受体的完整染色体则称为 受体内基因 子,这样的 细菌称为部 分二倍体或 部分合子、 半合子 2、中断杂交试验及染色体连锁 图 为了证明接合时遗传物质从供体到受体细胞的转移是直线式进行的,Jacob和Wollman在五十年代设计了一个著名的中断杂交试验 ? Hfr:thr+leu+lac+gal+azistonsstrs F- : thr-leu-lac-gal-aziRtonRstrR ? 每隔一定时间取样,放在食物搅拌器内搅拌 ? 培养在含str的完全培养基上, Hfr被杀死 ? 用影印培养法测试形成的F-菌落的基因型, 确定每个基因转入F-的顺序(时间) ? 根据基因转入F-的时间,进行细菌染色体作图 ? ? ? ? ? ? 图7-17 中断杂交后,重组体中Hfr遗传性状出现的频率 thr leu azi ton lac ga F O 8 8.5 9 11 18 25 根据中断杂交实验作出的大肠杆菌连锁图 用不同的Hfr菌株进行中断杂交实验,基因转移的原点(O)和转移的方向不同,说明F因子和细菌染色体都是环状的 Hfr的 类型 基 因 转 移 顺 序 HfrH 1 2 3 AB312 0 thr pro lac pur gal his gly thi 0 thr thi gly his gal pur lac pro 0 pro thr thi gly his gal pur lac 0 pur lac pro thr thi gly his gal 0 thi thr pro lac pur gal his gly 表 7-5 用中断杂交法确定的几个Hfr菌株的基因顺序 如果两个基因间的转移时间小于2分钟,用中断杂交法所得的图距不太可靠,应采用传统的重组作图法。 lac+ade+ 基本培养基 lac+ ade– lac–ade– lac-ade+ 完全培养基- ade lac-ade+ 重组频率= ×100% = 22% lac+ade+ + lac-ade+ 这两个位点间的时间单位约为1分钟→ 20%重组值 三、性导 性导:指接合时由F′因子所携带的外源DNA转移到细菌染色体的过 程 F因子整合到宿主细菌染色 体的过程是可逆的,当发 生环出时偶然不够准确, 携带有染色体的一些基因, 称这种F因子为F′因子 F′因子特点 (1)以极高的比率转移它的基因 (2)有极高的自然整合率,而且整合在
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