广工酵母菌血球计数板计数实验报告.pdf

酵母菌的血球计数板计数技术 1 实验目的  复习血球计数板的使用方法。  利用血球计数板对酵母菌数量进行计算。 2 实验原理及实验方法 2.1 血球计数板 血球计数板是一种常用的细胞计数工具。血球计数板是一块比普通载玻片大而厚的特制玻璃片。（见图 2.1）中 间有四条槽沟，其间形成三个平台，中央的平台比两边的稍低，加盖玻片以后，中央的平台比两边平台低0.1 毫米， 中央平台的中部被一小槽沟分隔成上下两半，每半边各刻有一个方格网，方格网上刻有9 个大方格，只有中间的一 个大方格为计数室，供计数用。每个血球计数板有上下两个计数室。计数时中格的边界是双线，要以内线为边界。 血球计数板有两种规格。一种血球计数板的计数室有25 个中格，每个中格有16 个小格，共400 个小格，总容 积为0.1 mm3 （见图 2.2 ）；另一种类型的血球计数板的计数室有16 个中格，每个中格有25 个小格，一样共400 个 小格，总容积也为0.1 mm3 （见图 2.3 ）。 ① ② 0.1mm XB-K-25 ③ 小方格 中方格 1 2 mm ④ ⑤ 400 C 图 2.2 25x16 型 2 A ① ② B 1 3 小方格 图 2.1 血球计数板 中方格 A 正面图 B 纵切面图 C 一个计数室 ③ ④ 1 血球计数板 2 盖玻片 3 计数室 图 2.3 16x25 型 1 实验 酵母菌的血球计数板计数 2.2 血球计数板的使用 通过对一定数量的小格 （中格）计数，根据相应小格 （中格）所占的体积，可以推算出单位体积的溶液中微生 物细胞的密度或总数。实验过程中，一般对计数室四角上的四个中方格以及正中间的一个中方格进行统计 （五点取 样法，见图 2.2 所示五个中方格区域）；对于压线的，采取计上不计下，计左不计右的原则；将五个中格中微生物 3 细胞之和扩大5 倍即为一个计数室中微生物细胞的总数，而一个计数室的总容积为0.1 mm ；或者将五个中格中微 生物细胞之和除以小格数，即为每个小格中微生物总数，而每个小格的体积与计数室总体积比值一定，由此即可推 算出单位体积或溶液中微生物细胞的密度或总数。 2.3 实验数据计算方法 设每毫升有x 个酵母菌 N x 个 N 小格  16  25 规格：25 中格*16 小格 N 小格 5 *