ma啡对神经细胞L-型Ca2+通道影响的实验研究.pdfVIP

中文摘要 目 的 吗啡为一历史悠久的阿片类镇痛药物，应用广泛，但其作用原理、 耐受、成瘾及戒断综合症机理尚未完全明了，因而影响此类药物的临床 应用，及对戒断综合症的治疗。本实验应用膜片钳技术，在单通道水平 研究不同浓度吗啡及预先加入纳络酮对不同神经元上L．型Ca2+通道的 影响，以完善该类药物作用及其戒断综合症的机理，为临床进一步合理 应用与治疗成瘾依赖提供理论基础。 方法和结果 一、吗啡对人神经母细胞瘤SK-N．Sl-I细胞上L．型Ca2+通道的影响 方法培养人神经母细胞瘤SK-N．SH细胞，应用细胞贴附式膜片钳 技术记录SK—N—SH细胞上Ca2+通道电流，分析电生理学特性。在浴槽 加入10。5mol／L纳络酮，再加入上述不同浓度吗啡，记录通道电流，比 较不同组之间整体平均电流、开放时间、电导及．10mv指令电压下开放 概率的变化。 结果在SK-N．SH细胞上记录到内向Ca2+通道电流，其电导为(27．8 0．018)pA，开放概率(0．035±0．004)。电极液中加入0．5口mol／L Bay K8644通道开放时间明显延长(P．0．叭)，整体平均电流和开放概率增 特性。吗啡浓度为10‘8mol／L时不影响上述ca2+通道电生理参数(P 0．05)，当其浓度达107．mol／L时可显著抑制通道整体平均电流(尸0．05)， 浓度≥106mol／L，明显降低通道整体平均电流(PO．01)、开放概率 (P_0．01)，缩短开放时间(P．O．05)，具有剂量依赖性，但不影响其电 导(P0．05)。预先加入纳络酮，再加入不同浓度吗啡，上述ca2+通道 ．2． 电生理参数无明显改变(PO．05)，纳络酮可逆转吗啡对ca2+通道的抑 制作用。 二、吗啡对成年大鼠海马神经元上L．型Ca2+通道的影响 方法急性分离成年大鼠海马锥体神经元，应用膜片钳细胞贴附式 技术记录不同浓度吗啡对L．型ca2+通道电生理学影响，及预先加入纳 络酮对此影响的作用。 结果急性分离海马锥体神经元形态良好，适于膜片钳研究。吗啡 时可显著抑制ca2+通道整体平均电流(P0．01)，具有剂量依赖性，不 影响通道电导(P0．05)。纳络酮可逆转吗啡的抑制作用。 结 论 一、人神经母细胞瘤SK．N．SH细胞上存在L．型Ca”通道，其电生 理特性与其他类型神经元上L．型ca2+通道类似。 二、吗啡剂量性地抑制SK．N．SH细胞上L一型ca2+通道电流，缩短 平均开放时间，降低开放概率。预先加入纳络酮可逆转吗啡对ca2+通道 抑制作用，表明吗啡通过∥邛可片受体抑制SKiN—SH细胞上L．型ca2+ 通道活性。 三、吗啡可抑制大鼠海马锥体神经元上L．型ca2+通道电流，具有 剂量依赖性。其抑制作用亦通过_4．7片受体产生。 关键词膜片钳技术；钙通道，L．型Ca2+通道；阿片受体，口邛可片 受体；神经母细胞瘤；海马；BayK8644 Abstract objective usedin clinic，the mechanism， widely pharmacologic Alough of werenot tolerance，addiction,withdrowsyndromemorphine the wererestricted．Theofthisresearch clear,therefore objective application wereto theeffectofthevariousconcentrationof onthe