氯酚酸酯急性毒性试验设计.doc

氯酚酸酯急性毒性试验设计 通过进行氯酚酸酯毒性试验设计来研究其对机体的毒性效应。氯酚酸酯作为外源化合物，它的毒性作用也是通过生物体表现出来的，所以生物体对氯酚酸酯的吸收、排泄及代谢转化过程和生物体本身的种属品系、年龄、营养及健康等机体状态也是影响其毒性作用的重要因素。因此，此次对氯酚酸酯的急性毒性试验设计包括实验动物的选择及分组、氯酚酸酯进入机体的剂量和方式及时间分布、观察指标和的计算等内容。以下即为氯酚酸酯急性毒性试验的设计内容： 实验动物的选择 本次试验选择大鼠作为研究对象。因为大鼠在代谢和毒性反应上与人类较为接近，并且大鼠的繁殖能力较强、价格较低、体积小（占地少、易操作）、寿命短（实验期短）、食谱与人相似（杂食动物）及具有便于分析比较明确的生物学指标。因此最终依据实验目的和要求对动物性别选择的原则，我们共选择了24只雌雄各半、出生2~3月龄、体重200g左右的大鼠作为氯酚酸酯毒性实验的研究对象。 各剂量组动物数及实验动物分组 为了消除和尽量降低动物的个体差异对实验结果的影响，我们对动物进行随机分组。将24只雌雄各半的大鼠分成4个实验组，具体操作如下： （1）先将雌雄动物分开，分别按随机方法分组。 （2）将动物称重，编号并记录每只动物的体重及号码。用染色法对大鼠进行编号，以头部位为1号，按顺时针方向，右前肢为2号，右肋部为3号，右后肢为4号，尾根为5号，左后肢为6号，左肋部为7号，左前肢为8号，背部为9号，不染色为10号，在相应部位染不同形状或大小的色块分别代表10,20，…90等。 （3）随机分组。将实验动物按体重大小顺序排队，35只动物按体重从大到小排队依次为1,2,3，…24号，再取随机数字分配到1～24号动物，每个随机数字（n），以余数0,1,2,3，…将动物分配至各组。每组6只，分4组，分配方法和结果见下图： 实验动物随机分组表 动物号 1 2 3 4 5 6 7 8 随机数字余数 归组 26 2 C 99 3 D 61 1 B 65 1 B 53 1 B 58 2 C 37 1 B 78 2 C 动物号 9 10 11 12 13 14 15 16 随机数字余数 归组 80 0 A 70 2 C 42 2 C 10 2 C 50 2 C 67 3 D 42 2 C 32 0 A 动物号 17 18 19 20 21 22 23 24 随机数字余数 归组 17 1 B 55 3 D 85 1 B 74 2 C 94 2 C 44 0 A 67 3 D 16 0 A 分组结果为：A组——9,16,22,24。共4只。 B组——3,4,5,7,17,19。共6只。 C组——1,6,8,10,11,12,13,15,20,21。共10只。 D组——2,14,18,23。共4只。 为使各组大鼠数均为6只，应再按随机分配原则从C组选2只给A组、2只给D组。为此，需继续查随机数字表，C组87，59，36，22。C组87/4余1，将第2只大鼠即6号给A组，59/4余3，将第4只大鼠即10号给A组。以此类推，最后经调整后的分组情况见下表。 24只大鼠随机分组结果 组别 动物号 组别 动物号 A B 6 9 10 16 22 24 3 4 5 7 17 19 C D 11 12 13 15 20 21 1 2 8 14 18 23 (三)剂量选择及剂量分组 探讨外来化学物急性毒性应首先测定半数致死量或浓度（或），先做预试验。通过查阅文献，找出氯酚酸酯的近似毒性资料，以此预期毒性中值作为氯酚酸酯的中间剂量组，在上下各1~2个剂量组做预实验。初起组距用计量间的4倍差，即以㏒4来划分各组剂量。 氯酚酸酯的近似已知毒性化学物2，4-滴对大鼠的经口急性大于400mg/kg，2，4，5-涕对大鼠的经口急性为300 mg/kg，2-甲-4-氯对大鼠的经口急性为700 mg/kg体重。取毒性化学物2，4-滴对大鼠的经口急性大于400mg/kg为氯酚酸酯的中间剂量，组距取对数值（ ㏒4=0.6）,上下各推两个剂量组，则氯酚酸酯大鼠经口预实验的剂量设计见下表。 氯酚酸酯大鼠经口预实验剂量设计 组别 剂量/(㎎/㎏) 对数值 组别 剂量/(㎎/㎏) 对数值 1 2 100.4847 400 2.6021—0.6 2.6021 3 4 1592.5754 6340.1568 2.6021+0.6 2.6021+0.6*2 （1） 再次求出正式试验的剂量组距(?)值; ? =(㏒ - ㏒)/(n-1) 式中i为组距，表示相邻两个剂量组剂量对数之差或相临两组剂量比值的对数