生物学细菌鉴定.doc

细 菌 鉴 定 目录 第一章 葡萄菌属第二章 链球菌属第三章 肠球菌属第四章 奈瑟菌属第五章 棒状杆菌属第六章 李斯特菌属第七章 奴卡菌属第八章 军团菌属第九章 弧菌科第十章 布兰汉菌亚属第十一章 假单胞菌属第十二章 莫拉菌属第十三章 肠杆菌科 菌种 新生霉素耐药（5μg/片） 多粘菌素B耐药（300U/片） 脲酶 木糖 蔗糖 甘露醇 血浆凝固酶 金黄色葡萄球菌 - + + - + + + 表皮葡萄球菌 - + + - + - - 腐生葡萄球菌 + - + - + + - 溶血葡萄球菌 - - - - + d - 中间型葡萄球菌 - - + - + + + 模仿葡萄球菌 - - + - + + - 木糖葡萄球菌 + - + + + + - 孔氏葡萄球菌 + - d - - + - 华纳葡萄球菌 - - + - + d - 人型葡萄球菌 - - + - + - - 耳葡萄球菌 - - - - d - - 松鼠葡萄球菌 + - - - + + - 解糖葡萄球菌 - - - - - - - 　　注：d 为反应不定。 四、 葡萄球菌属鉴定流程 样品提取：脓液、创面分泌物、穿刺液、咽拭子、尿液、痰液等 脑脊液、血液 粪便、呕吐物 直接涂片 分离培养 增菌培养（5%二氧化碳） 染色、镜检 接种血平板、接种葡萄糖肉汤或其他商品化培养基（5%二氧化碳） 分离培养 初步报告结果 挑选可疑菌落 接种高盐甘露醇平板 鉴定试验 涂片 染色 镜检 血浆凝固 耐热酶试验 DNA酶试验 药敏试验 手工及仪器鉴定 报告结果 链球菌属 一、 链球菌属介绍 链球菌属是一群触酶试验阴性、呈链状排列的革兰阳性球菌。Bergtey’s分类法将链球菌属分为6个生物群、29个种，如化脓性链球菌、无乳链球菌和肺炎链球菌等。Lancefield根据链球菌细胞壁多糖抗原不同，将该菌属分为18个血清群，即A、B、C、D、E、F等。另外，传统上根据溶血现象将该菌属分为α-溶血或草绿色溶血链球菌、β-溶血或乙型溶血链球菌、γ-溶血或不溶血链球菌。 链球菌广泛分布于自然界，常居于人体的鼻咽腔和肠道中。在链球菌属中，化脓性链球菌、无乳链球菌和肺炎链球菌是三种重要的致病菌，可引起化脓性扁桃腺炎、急性咽炎、医源性伤口感染、风湿热、肾小球肾炎以及呼吸道感染等。 二、 生物学特性 链球菌呈圆形或卵圆形，直径0.5-1.0μm，呈单个、成双或链状排列，链的长短不一。革兰染色阳性，无鞭毛、无芽孢。肺炎链球菌呈矛头状，有荚膜。本菌属营养要求较高，需在含有血液或血清、葡萄糖、氨基酸、维生素等物质的培养基中才能生长。最适温度为35-37℃，最适pH7.4-7.6。在血琼脂平板上经35-37℃培养18-24小时，可形成灰白色、圆形、凸起、直径为0.5-0.75mm的小菌落。不同的菌株可有不同的溶血反应，观察溶血现象，对链球菌的鉴定有很大帮助。触酶试验阴性，分解葡萄糖产酸不产气，除肺炎链球菌外，链球菌不分解菊糖。 三、 鉴定 杆菌肽敏感试验：95%以上的化脓性链球菌对杆菌肽（每纸片含0.04单位）敏感，抑菌环≥10毫米为敏感。 CAMP试验：无乳链球菌CAMP试验为阳性，其它链球菌为阴性。 Optochin敏感试验：几乎所有的肺炎链球菌都对Optochin敏感。抑菌环≥18毫米为敏感。 表 β-溶血性链球菌的主要生物学特性 血清群 菌名 PYR V-P CAMP 杆菌肽 胆汁七叶苷 山梨醇 海藻糖 A 化脓性链球菌 + - - + - - + B 无乳链球菌 - + + - - - + C 马链球菌 - - - - d - - C 似马链球菌 - - - - - - + C 兽疫链球菌 - - - - d + - ACFG 咽峡炎链球菌 - + - - + - + 注：PYR：L-吡咯烷酮-萘酰胺水解。d：为反应不定。 表 非β-溶血性链球菌的主要生物学特性 菌 名 Optochin敏感 胆汁溶菌 胆汁七叶苷 PYR V-P 山梨醇 葡萄糖 肺炎链球菌 + + - - - - - 牛链球菌 - - + - - - d 变异链球菌 - - + + + + + 中间型链球菌 - - d - + - - 血链球菌 - - d - - - + 注： d 为反应不定 四、 链球菌鉴定程序 样品提取：咽拭子、痰液、脓液、穿刺液等 脑脊液、血液 增菌培养（5%二氧化碳）接种葡萄糖肉汤或其血琼脂平板（5%二氧化碳） 涂片 染色 镜检 挑选可疑菌落 鉴定试验 血清学分类 杆菌肽敏感试验CAMP试验 Optochin敏感试验 胆汁溶菌试验 草绿色链球菌群鉴定 其他鉴定系统 A、B、C A群链球菌 B群链球菌 D、F、G 肺炎链球菌 草绿色链球菌等群链