生物选修三 基因工程与细胞工程 精简总结.ppt

二、真核细胞的基因结构 原核细胞 真核细胞 不同点 编码区是 连续的 编码区是间隔的、不连续的 相同点 都由能够编码蛋白质的编码区和具有调控作用的非编码区组成的 原核细胞与真核细胞的基因结构比较： RNA聚合酶能够识别调控序列中的结合位点，并与其结合。转录开始后，RNA聚合酶沿DNA分子移动，并与DNA分子的一条链为模板合成RNA。转录完毕后，RNA链释放出来，紧接着RNA聚合酶也从DNA模板链上脱落下来。 （三）目的基因导入受体细胞 物理：基因枪、显微注射、电激等 化学：氯化钙等（增大细菌细胞壁的通透性） 生物：病毒感染、质粒转化等 基因提取方法 优点 缺点 鸟枪法 反转录法 根据已知氨基酸合成DNA法 操作简便 广泛使用 工作量大，盲目，分离出来 的有时并非一个基因 专一性强 操作过程麻烦，mRNA很不稳定， 要求的技术条件较高 专一性最强 仅限于合成核苷酸 对较少的简单基因 动物细胞培养的条件 1.无毒、无菌的环境: 通常要添加一定量的抗生素 2.营养： 需要有糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。 3.温度和PH值： 多数细胞生存的适宜PH为7.2-7.4 4.气体环境: 需要O2和CO2，主要作用是维持培养液的PH。通常将培养瓶放在含95%空气加5%的CO2的混合气体中培养 一、DNA的一级结构 脱氧核糖核酸的排列顺序 可以用碱基排列顺序表示 连接键：3’，5’-磷酸二酯键 磷酸与戊糖顺序相连形成主链骨架 碱基形成侧链 多核苷酸链均有5’-末端和3’-末端 DNA的碱基顺序本身就是遗传信息存储的分子形式。生物界物种的多样性即寓于DNA分子中四种核苷酸千变万化的不同排列组合之中。 单一功能： 两种功能：如NH3，既是硝化细菌的氮源也是它的能源 三种功能：如蛋白质，具有碳源、氮源和能源的功能 含有C、H、O、N的化合物可以是碳源、氮源、能源，但却不一定是能源，如NH4HCO3。 营养物质的功能 微生物代谢指生物细胞内发生的全部化学反应。 2、微生物的代谢 不 同 是否为生长繁殖所必需 初级代谢产物 次级代谢产物 产生阶段 种的特异性 分布 举例 相 同 是 否 一直产生 生长到一定阶段产生 无 有 细胞内 细胞内或外 氨基酸、核苷酸、多糖、脂类、维生素等 抗生素、毒素、激素、色素等 均在微生物细胞的调节下，有步骤产生 微生物的代谢的调节 酶合成的调节 酶活性的调节 原理 主要原因 实例 意义 通过影响酶的合成来调节微生物的代谢 改变已有酶的活性来调节代谢速率 环境中存在诱导物情况下才可合成（诱导酶） 代谢产物与酶结合致使酶结构变化 大肠杆菌乳糖代谢中半乳糖苷酶的合成 谷氨酸生产过程中，大量谷氨酸的积累抑制谷氨酸脱氢酶的活性 既保证代谢需要又避免浪费，增强微生物对环境适应能力 不会积累大量的代谢产物，保证各种代谢经济高效进行 诱导酶的合成除取决于诱导物以外，还取决于细胞内所含的基因