心肌细胞死亡与心衰及中医药干预.pptVIP

心肌细胞死亡与心力衰竭发病及中医药干预 一、心肌细胞死亡的形式 （一）凋亡（apoptosis） （二）自噬（autophagy） （三）胀亡（oncosis） 程序性细胞死亡 （programmed cell death， PCD） （一）凋亡 ●主动死亡 受基因控制 ●形态特征: 染色质固缩、边集； 胞质浓缩； 凋亡小体； 细胞器保存完好 ●生化表现： DNA电泳呈现特征性的“梯”状条带 凋亡小体 Hoechst染色--核碎裂 DNA电泳呈现特征性的“梯”状条带 （二）自噬 双层膜结构 自噬前体 自噬体 自噬溶酶体 降解 双层膜：来源不明。粗面内质网？高尔基体？ 作用：自噬程度总是保持在一个稳定的水平 适度增强：利于细胞蛋白质回收和消除受损细胞器。 过度增强：可能造成过度的自我消化，最终使细胞死亡。 自噬的三种类型 巨自噬的过程 自噬的分子机制 自噬的检测 Western blot--LC3Ⅱ 免疫荧光 GFP-LC3 单丹磺酰尸胺(MDC) 染色 （三）胀亡（oncosis） 1995年 Majno 首次提出胀亡的概念 Oncosis 源于希腊文onkos 意为肿胀 表现 细胞肿胀 胞浆空泡化 最终细胞和细胞核溶解 细胞内容物外溢 局部炎症反应 二、心肌细胞不同死亡形式与  心衰关系的研究进展 （一）心肌细胞凋亡与心力衰竭 研究者：Olivetti等 病例：难治性心衰36例（心脏移植术后及AMI死后心脏标本），正常对照3例 方法：组化、生化法检测心肌细胞凋亡率；Western Blot检测Bax和Bcl-2表达 结果：心衰组细胞凋亡率是对照组的232倍，Bcl-2是对照组的1.8倍， Bax未见显著差异 研究者：Yamamura等 病例：糖尿病心肌病（DCM）16例（心内膜活检标本），正常对照 3例 方法：TUNEL法检测心肌细胞凋亡率；组化检测Fas表达 结果：Anti-Fas-Ab：DCM组显著升高(P0.05) TUNEL(+)细胞数：DCM组显著升高(P0.05)且左室收缩功能严重紊乱者显著高于轻微损伤者 Li A等报道，自发性高血压大鼠在向心力衰竭转变过程中，细胞凋亡的数目较非心力衰竭的自发性高血压大鼠高4倍，而较对照组的WKY鼠高17倍。 （二）心肌细胞自噬与心力衰竭 自噬参与心力衰竭的发病 Autophagic vacuole in electronograph of model group（×15000） Counting of autophagic vacules 自噬可能损伤心肌细胞 我们的研究工作证明： 心肌细胞自噬参与了高血压和阿霉素性心力衰竭的发病 自噬的特异性抑制剂3MA可有效防治大鼠高血压和阿霉素性心力衰竭。 Hongxin Z等用主动脉缩窄法建立心力衰竭的模型 心衰组中可检测到心肌细胞自噬的程度增加 （三）心肌细胞胀亡与心力衰竭 Kostin S 等对特发性扩张型心肌病19例和7例正常对照者的心脏进行了分析， 结果发现在人类衰竭的心脏中心肌细胞的凋亡、胀亡和自噬的程度大致相当。胀亡在心肌病者和正常对照组的发生率分别为0.06%和0.001％，两组间有统计学差异。 Arbustini E 观察到心肌细胞的胀亡有特定的形态学特征，它可以与细胞凋亡、自噬在同一时间共存于同一心脏，而这些细胞死亡方式可发生在缺血性和非缺血性心脏衰竭。 心肌细胞的胀亡在心力衰竭的过程中参与了心肌细胞进行性减少的过程。 它与凋亡和自噬等心肌细胞死亡形式一并发生。 三、挽救濒死心肌、防治心肌细胞死亡在心衰防治中的作用与前景 （一）干预细胞死亡在防治心力衰竭中的研究进展 我们的研究发现： ghrelin可以通过抑制心肌细胞凋亡，改善阿霉素性心衰大鼠的心功能 我们的研究发现：自噬抑制剂3MA可以通过抑制心肌细胞自噬，明显改善高血压性和阿霉素性心衰大鼠的心功能 Autophagic vacuole in electronograph of model group（×15000） （二）单味中药抗心肌细胞凋亡研究进展 葛根素：再灌注时加入葛根素抑制缺血损伤过程中Fas 蛋白的表达，从而抑制大鼠心肌细胞凋亡；且在兔缺血模型中上调Bcl -2 蛋白而减少心肌细胞凋亡 西洋参总皂苷：通过下调Fas蛋白表达，上调Bcl -2 蛋白表达，明显抑制急性心肌梗死后大鼠心肌细胞凋亡 当归：通过上调凋亡抑制基因Bcl-2 和下调凋亡加速基因Bax 的表达减少大鼠心梗灶边缘区心肌细胞的坏死，改善